[发明专利]一种胶体金试纸、其制备方法及水稻种子活力的检测方法

说明书

本发明涉及种子活力检测领域，特别涉及一种胶体金试纸、其制备方法及水稻种子活力的检测方法。所述胶体金试纸包括底板、样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，所述胶体金结合垫上结合有胶体金标记物，所述胶体金标记物为胶体金标记的抗氧化酶抗体；所述检测线上包被发芽率为99％的水稻种子的胚蛋白提取液；所述质控线上包被与抗氧化酶抗体相匹配的免疫球蛋白IgG。本发明的胶体金试纸可以快速检测水稻种子的活力，步骤简单，检测结果准确率高，结果容易观察。

技术领域

本发明涉及种子活力检测领域，特别涉及一种胶体金试纸、其制备方法及水稻种子活力的检测方法。

背景技术

水稻是我国的主要粮食作物之一，在生产以及种质资源的保存上都占据了重要的份额。种子作为水稻生产中最基本的生产资料，其质量直接影响到水稻的产量与品质，而种子活力是反映种子质量的一项重要指标。种子活力的测定主要有三大类方法：发芽法、逆境法和生理生化法。传统的检测种子活力方法是进行发芽试验，一般是三次或四次重复，每个重复100粒种子，在恒温发芽箱进行暗培养，培养4天获得发芽势，7天之后才能得到发芽率，通过测定种子萌发速度、幼苗健壮程度以及活力指数来判断种子的活力。传统方法需要的种子量较多，并且时间相对比较长。逆境法是将种子置于不同的逆境条件下进行处理，活力高的种子抗逆性强，低的抗逆性弱，然后再进行萌发。生理生化法包括四唑测定法和电导率法。这些方法需要专业的仪器，并且需要比较复杂的操作，不利于快速测定。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种胶体金试纸、其制备方法及水稻种子活力的检测方法，该方法可以快速检测水稻中的活力，步骤简单，检测周期短，检测结果准确率高。

本发明提供了一种检测水稻种子活力的胶体金试纸，包括底板(7)、样品垫(1)、胶体金结合垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水垫(6)，所述硝酸纤维素膜(3)上设置有检测线(4)和质控线(5)，所述硝酸纤维素膜(3)贴合在底板(7)上，硝酸纤维素膜(3)两端分别接合有胶体金结合垫(2)和吸水垫(6)，所述的检测线(4)设置在靠近胶体金结合垫(2)的一端，质控线(5)在靠近吸水垫(6)的一端，所述的样品垫(1)贴合在胶体金结合垫(2)上，

所述胶体金结合垫(2)上结合有胶体金标记物，所述胶体金标记物为胶体金标记的抗氧化酶抗体；

所述检测线(4)上包被发芽率为99％的水稻种子的胚蛋白提取液；

所述质控线(5)上包被与抗氧化酶抗体相匹配的免疫球蛋白IgG。

优选地，所述抗氧化酶抗体为抗坏血酸过氧化物酶抗体或者锰超氧化物歧化酶抗体。

优选地，所述胶体金与抗氧化物酶抗体的体积质量比为100微升：40～75纳克。

优选地，所述发芽率为99％的水稻种子的胚蛋白提取液的制备方法为：

将20～30毫克的芽率为99％的水稻种子的胚在缓冲液中研磨成匀浆，离心取上清液，重复离心及取上清液3～5次，得到胚蛋白提取液。

优选地，所述缓冲液为0.1mol/L的Tris缓冲液或者0.1mol/L的磷酸缓冲液。

本发明提供了一种检测水稻种子活力的胶体金试纸的制备方法，包括以下步骤：

(S1)调节胶体金溶液的pH值至中性，加入抗氧化酶的抗体，持续搅拌；加入大分子聚合物，搅拌后离心，取上清液再次离心，留取沉淀，用缓冲液将沉淀完全溶解，涂在胶体金结合垫上，烘干待用；

(S2)将发芽率为99％的水稻种子的胚蛋白提取液包被于检测线上；

(S3)将与抗氧化酶抗体相匹配的免疫球蛋白IgG包被于质控线上；