[发明专利]一种降解畜禽粪便中抗生素的方法

权利要求书

1.一种降解畜禽粪便中抗生素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）收集畜禽粪便，将其平铺在地面或者塑料薄膜上晾晒，晾晒至粪便的含水量为30-50%；

（2）往平铺的粪便上喷洒复合发酵菌剂，搅拌均匀后继续均匀铺开，并铺上一层薄土，进行第一次发酵降解抗生素，在室温条件下发酵5~7天，每隔3~4天搅拌一次，至含水量为10-20%；

（3）发酵结束后，加入分解藻剂，搅拌均匀后继续平铺，平铺高度≤3cm，然后利用红外辐射装置进行红外辐射，每天照射5h，共照射3~5天，进一步降解抗生素；

（4）红外辐射结束后，将粪便堆起，形成小山丘，并采用塑料薄膜将粪便包住，采用高温堆肥进行二次发酵降解抗生素，每隔4~5天搅拌一次，连续发酵8天。

2.根据权利要求1所述一种降解畜禽粪便中抗生素的方法，其特征在于，所述复合发酵菌剂由以下重量份的组分组成：短小芽孢杆菌菌剂7~15%、鞘氨醇单胞菌菌剂5~13%、黑曲霉菌剂6~12%、绿色木霉菌剂6~10%。

3.根据权利要求1所述一种降解畜禽粪便中抗生素的方法，其特征在于，所述复合发酵菌剂加入量为100~500 g/m³。

4.根据权利要求1所述一种降解畜禽粪便中抗生素的方法，其特征在于，所述复合发酵菌剂是通过以下制作方法制得：

第一步，菌种活化，将初代菌使用涂布法接种到相应固体培养基中，25~37℃培养5~7天；

第二步，筛选和纯化抗性菌株，用无菌接种环从培养基中挑选生长良好的正确的菌株，使用三线法接种于含抗生素的相应的固体培养基中，培养箱温度设置为25~37℃；待菌株进入生长期即生长到第三线时，使用无菌接种环挑选第三线中生长良好的单一菌落接种于新的含抗生素的相应的固体培养基中，25~37℃条件下进行纯化培养，记录每种菌株进入生长期的时间为T；

第三步，抗性菌株液体发酵，待纯化的菌株生长到第三线中端时，使用无菌接种环将第三线中的菌落接种到相应的无抗生素添加的液体培养基中，震荡培养，培养时间为T，培养温度为25~37℃，培养时间结束后，离心，收集菌体并称重；

第四步，抗性菌株菌剂的制备，将收集的各菌种的菌体与稻壳粉及保护剂按1:3:0.3的比例混合，喷雾干燥，即得菌剂；

第五步，复合抗性菌剂的使用，将4种菌剂按照比例进行混合均匀，即为复合发酵菌剂。

5.根据权利要求4所述一种降解畜禽粪便中抗生素的方法，其特征在于：所述复合发酵菌株所用培养基为：短小芽孢杆菌和鞘氨醇单胞菌所用培养基包括蛋白胨12g、酵母提取物10g、磷酸氢二钾1.2g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁4.5g、氯化钠1g，加水至1000mL，调节pH为7.2~7.5；绿色木霉和黑曲霉所用培养基包括马铃薯200g、葡萄糖20g，加水1000mL，其中，固体培养基中加入琼脂10~15g/1000mL，液体培养基中无琼脂。

6.根据权利要求4所述一种降解畜禽粪便中抗生素的方法，其特征在于：所述含抗生素的培养基中加入抗生素为青霉素、卡那霉素、四环素、红霉素、氟苯尼考，加入量为0.05 % :（0.01~0.05）% : 0.15% : 0.05% : （0.02~0.1）%。

7.根据权利要求4所述一种降解畜禽粪便中抗生素的方法，其特征在于，所述菌剂保护剂为β-环糊精和吐温-80，按1 : 0.2比例混合加入。

8.根据权利要求1所述一种降解畜禽粪便中抗生素的方法，其特征在于：所述分解藻剂为红藻、三氯化铁和氯化钠混合；所述分解藻剂的添加量为红藻12~24g、三氯化铁2~4.8g、氯化钠1.2~3.4g；将三氯化铁和氯化钠溶解于100mL水中，高温灭菌后，再将红藻接入无菌水中，在光照下，25℃震荡培养3~5天。

9.根据权利要求1所述一种降解畜禽粪便中抗生素的方法，其特征在于：所述红外辐射照射波长为8~22，功率为250W~475W，辐射装置与物料间垂直距离为10~20cm。

10.根据权利要求1所述一种降解畜禽粪便中抗生素的方法，其特征在于：分解藻剂的添加量为300~500mL/m³。