[发明专利]通用型嵌合抗原受体T细胞制备技术

权利要求书

1.一种通用型嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)，其特征在于，所述CAR-T细胞具有以下特征：

(a)所述CAR-T细胞表达嵌合抗原受体CAR或表达T细胞抗原受体TCR，所述CAR靶向肿瘤细胞的标志物；和

(b)所述CAR-T细胞HLA-I与TCR(T cell receptor)的结合是被抑制的；

(c)所述CAR-T细胞的TCR表达是沉默的；

(d)所述的CAR-T细胞中的HLA-E是被上调或被过表达的。

2.如权利要求1所述的CAR-T细胞，其特征在于，所述CAR-T细胞表达外源性HLA-E SCT(HLA-E单链三聚体)。

3.如权利要求2所述的CAR-T细胞，其特征在于，所述的HLA-E SCT包括自身抗原肽，β2M和HLA-E重链。

4.如权利要求2所述的CAR-T细胞，其特征在于，所述的HLA-E SCT的结构如下式III所示：

L3-S-B-E (III)

式中，

各“-”独立地为连接肽或肽键；

L3为任选的信号肽序列；

S为自身抗原肽元件；

B为突变的β2M元件；

E为HLA-E重链元件。

5.如权利要求1所述的CAR-T细胞，其特征在于，所述的HLA-I包括HLA-A、HLA-B、和/或HLA-C。

6.如权利要求5所述的CAR-T细胞，其特征在于，所述CAR-T细胞的β2m的基因表达是被沉默的，从而使得HLA-A、HLA-B、和/或HLA-C与TCR(T cell receptor)的结合被抑制。

7.如权利要求1所述的CAR-T细胞，其特征在于，所述CAR-T细胞表达外源性NK细胞抑制性受体的配体片段或抗体片段，较佳地，所述的NK细胞抑制性受体为CD94/NKG2A。

8.如权利要求1所述的CAR-T细胞，其特征在于，所述的CAR的结构如下式I所示：

L1-scFv-H1-TM1-C-CD3ζ(I)

式中，

各“-”独立地为连接肽或肽键；

L1为任选的信号肽序列；

scFv为抗原结合结构域；

H1为任选的铰链区；

TM1为跨膜结构域；

C为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列。

9.一种制备权利要求1所述的CAR-T细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(A)提供一待改造的T细胞；和

(B)对所述的T细胞进行改造，从而使得所述的T细胞表达CAR，并且所述T细胞中TCR是表达沉默的，并且所述T细胞中HLA-A、HLA-B、和/或HLA-C与TCR的结合被抑制，并且所述T细胞中的HLA-E是被上调或被过表达，从而获得权利要求1所述的CAR-T细胞。

10.权利要求1所述的CAR-T细胞的用途，其特征在于，用于制备预防和/或治疗癌症或肿瘤的药物或制剂。