[发明专利]通关藤中C21甾体皂化合物及其用途

说明书

本发明涉及C21甾体皂苷化合物及其在制备抗肺癌药物中的用途。生物学实验结果表明，所述化合物可以抑制肿瘤细胞迁移并使其处于G0/G1期。此外还可以通过上调Bax和下调Bcl‑2表达、从而释放Cytochrome c、最后激活Caspase 3和Caspase 9来诱导肿瘤细胞凋亡。同时也可以激活caspase 8并通过死亡受体途径诱导细胞凋亡。本发明所述化合物可以通过下调MMP‑2和MMP‑9蛋白的表达来抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭，效果显著，达到抗肺癌的作用。

技术领域

本发明属于天然产物化合物制药领域，涉及C21甾体皂苷化合物及其用途。

背景技术

肺癌对人类健康和生存质量产生高度威胁，近年来已成为癌症死亡的主要原因。近十年来全世界约有160万人被诊断为肺癌，死亡人数超过130万人，此外，肺癌位于男性致死癌症名单之首，在女性中仅次于乳腺癌。美国2017年发表的癌症报告指出，虽然肺癌的发病率在美国并不是第一，但仍然占据肿瘤死亡人数的首位，有超过四分之一的癌症死亡是由它引起，并且其中约85％-90％为非小细胞肺癌(NSCLC)。与小细胞肺癌(SCLC)相比，NSCLC细胞具有更长的生长周期，分裂速率较慢、扩散转移相对较晚。目前，手术治疗仍是早期NSCLC的主流，对于晚期或不能采取手术治疗的NSCLC，主要采取保守治疗方案。但即使这样，接受根治手术的肺癌患者的总体5年生存率约为35％-40％，5年生存率从IA期的77％下降到ⅢA期的23％，其中，约63.9％的患者因术后复发和转移死亡。攻克肺癌，探究病因、疾病进展和代谢机制，以及寻找针对肺癌的靶向药物，均是医学研究中的迫切问题。

中药是中国数千年传承而来的瑰宝。实践证明，与化药相比，中药有其独特的优势和特性，例如来源丰富，品种繁多，不良反应相对较少，通过多靶点、多通道发挥作用，通过多种药物组合提高治疗效果，减少毒副作用，价格相对较低等。因此，明确中药有效成分及其分离，进一步研究和探索其药理作用机制，开发新的抗肿瘤药物是各国学者关注的焦点。植物通关藤广泛分布于中国云南、贵州等省，是中国傣医的传统抗肿瘤药物。最近，市场上以通关藤为原料的消癌平的各种制剂已被证明具有抗癌作用。通关藤中含有的C21甾体皂苷是它们的主要活性成分。

发明内容

本发明首先使用A549，Caco-2，EC-109，PC-3和HepG2细胞系评估了MarsdenosideC(TGT-7)，11α-O-乙酰基-12β-O-苯甲酰基生长素B(TGT-9)，11-α-O-2-甲基丁酰基-12β-O-苯甲酰基生长素B(TGT-13)和11α-O-苯甲酰-12β-O-乙酰基琥珀酸B(TGT-15)的活性，我们发现从通关藤分离的上述化合物均能够有效抑制A549细胞，且比对其他细胞系更敏感。此外，我们使用台盼蓝染料排除试验研究了不同剂量的四种C21甾体皂苷对BEAS-2B正常人肺上皮细胞的细胞毒性作用，结果显示在0至100μM浓度范围内四种C21甾体皂苷对BEAS-2B细胞无毒性。

肿瘤细胞的迁移和侵袭与癌症的转移和复发密切相关，肿瘤切除后许多患者因癌症转移而死亡。MMP-2和MMP-9与肿瘤细胞的血管生成、侵袭和转移密切相关。本发明发现，四种C21甾体皂苷(TGT-7，TGT-9，TGT-13和TGT-15)均可降低A549细胞中MMP-2和MMP-9的表达，进而对癌细胞迁移导致的癌症起到有效地治疗作用。

固定位点的癌症爆发主要来自肿瘤细胞增殖。目前，已发现许多化疗药物可激活细胞中不同的信号通路，从而阻断肿瘤细胞的G0/G1期、S期或G2/M期，达到抑制肿瘤细胞增殖的目的。细胞增殖与细胞周期密切相关，细胞周期错误会导致细胞增殖进而引起癌症的发生。本发明发现，四种C21甾体皂苷(TGT-7，TGT-9，TGT-13和TGT-15)能够阻断A549细胞于G0/G1期，并阻止细胞向S期(DNA复制期)和M期(细胞分裂阶段)发展，以及使A549细胞生长和增殖减慢。