[发明专利]提高双歧杆菌培养浓度的传代培养方法

权利要求书

1.一种提高双歧杆菌培养浓度的传代培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将动物双歧杆菌菌株在改良的PTYG平板培养基培养基中反复划线纯化在体积百分比为20％CO₂-80％空气的二氧化碳培养箱中划线培养2-3次，每次平板培养时间是48h，最后一次划线获得的活化的纯的单菌落；

2)将纯的单菌落接种到装有种子培养基后在密闭条件下培养24h-48，获得种子液；

3)将种子液按体积百分比为2％接种量接入装有发酵培养基的容器中，然后密闭培养24-48h，获得第一代传代发酵培养液；

4)以后的每代的传代培养方法是，将上一代的传代发酵培养液进行一次平板划线、挑单菌落，然后将获得的单菌落按照步骤1)的方法进行种子液培养，再按照步骤2)的方法进行发酵培养。

2.根据权利要求1所述的提高双歧杆菌培养浓度的传代培养方法，其特征在于：所述的平板培养基、种子培养基及发酵培养基均为改良PTYG培养基。

3.根据权利要求1或2所述的提高双歧杆菌培养浓度的传代培养方法，其特征在于：步骤2)及步骤3)所述的培养的环境均为37℃下培养；且双歧杆菌的液态培养及接种后都是密封培养，所有的接种工作都是在普通超净工作台进行。