[发明专利]一个控制水稻稻瘟菌产孢量与侵染能力的蛋白有效
申请号: | 201811234108.1 | 申请日: | 2018-10-23 |
公开(公告)号: | CN109293756B | 公开(公告)日: | 2020-10-09 |
发明(设计)人: | 王维香;殷悦;周思达;赵新玉;崔丽娥;张梦玉 | 申请(专利权)人: | 北京农学院 |
主分类号: | C07K14/37 | 分类号: | C07K14/37;C12N15/31;C12N1/15;C12R1/645 |
代理公司: | 北京惟诚致远知识产权代理事务所(普通合伙) 11536 | 代理人: | 王慧凤;李巍 |
地址: | 102206 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一个 控制 水稻 稻瘟菌产孢量 侵染 能力 蛋白 | ||
1.由序列表中的SEQ ID №.1的氨基酸残基序列组成的蛋白质或其编码基因在降低稻瘟菌菌株P131产孢量和侵染能力中的应用,所述应用是将稻瘟菌菌株P131中的由序列表中的SEQ ID №.1的氨基酸残基序列组成的蛋白质的编码基因突变使其不能表达。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述编码基因的基因组DNA核苷酸序列为序列表中SEQ ID №:2所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述编码基因的cDNA核苷酸序列为序列表中SEQ ID №:3所示的核苷酸序列。
4.一种产孢量和/或侵染能力降低的稻瘟菌的获得方法,是将稻瘟菌菌株P131中的由序列表中的SEQ ID №.1的氨基酸残基序列组成的蛋白质的编码基因突变使其不能表达,筛选,得到产孢量和侵染能力降低的稻瘟菌突变株。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述将稻瘟菌菌株P131中的由序列表中的SEQ ID №.1的氨基酸残基序列组成的蛋白质的编码基因突变使其不能表达的方法是将所述蛋白质的编码基因敲除;所述敲除的方法是通过基因两侧的侧翼序列与野生型菌株基因组的相应序列发生同源重组,从而将基因组中相应位点基因组基因序列与潮霉素基因置换。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述敲除的方法是将敲除载体转化出发稻瘟菌菌株的原生质体,得到将基因组中由序列表中的SEQ ID №.1的氨基酸残基序列组成的蛋白质的编码基因与潮霉素抗性基因置换的转化子;所述敲除载体按照下述方法构建:以pKOV21载体为出发载体,将具有自序列表中序列2的第515-1606位核苷酸序列的左臂片段插入到pKOV21载体的EcoRI和SpeI酶识别位点之间,得到中间载体pKOV21-左臂,然后将具有自序列表中序列2的第3456-4551位核苷酸序列的右臂片段插入到中间载体pKOV21-左臂的KpnI和SalI酶识别位点之间,得到带有依次连接的具有自序列表中序列2的第356-1635位核苷酸序列的左臂片段、潮霉素抗性基因片段、具有自序列表中序列2的第3456-4551位核苷酸序列的右臂片段的重组载体。
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