[发明专利]一种蓝藻Lyngbya majuscula中的提取物及提取方法和应用

说明书

本发明公开了一种蓝藻Lyngbya majuscula中的提取物及提取方法和应用，从蓝藻Lyngbya majuscula中提取了三种新的结构的Aplysiatoxin衍生物，提取方法的优点在于简单方便，新的结构的Aplysiatoxin衍生物具有Kv1.5通道电流的强抑制作用，阻断活性显著，与目前已报道的Kv1.5抑制剂金合欢素相比，其对IKur电流的抑制作用远强于金合欢素，本发明提取的三种新的结构的Aplysiatoxin衍生物为研究和开发新的Kv1.5离子通道阻断药物提供了新的先导化合物。

技术领域

本发明涉及一种海洋蓝藻，尤其是涉及一种蓝藻Lyngbya majuscula中的提取物及提取方法和应用。

背景技术

海洋蓝藻是一种具有广泛生物活性和复杂结构的海洋微生物群体，由于其生存环境的特殊性,能产生大量结构新颖、功能独特的活性物质。其中，海洋蓝藻毒素及抗肿瘤活性物质已成为海洋生物活性物质研究的重点。

产自海南三亚陵水港附近海域的蓝藻Lyngbya majuscula中含有多种Aplysiatoxin衍生物，已经从该属蓝藻中分离得到了一些具有良好生物活性的Aplysiatoxin衍生物。Aplysiatoxin衍生物具有多种生物活性：促瘤活性、抗病毒活性和抗增殖活性等，其某些含溴的衍生物与佛波酯(PMA)作用机制相似，具有一定的促瘤作用，而某些脱溴衍生物促瘤活性明显低于Aplysiatoxin且无细胞毒性。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种蓝藻Lyngbya majuscula中的提取物及提取方法和应用。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种蓝藻Lyngbya majuscula中的提取物，该提取物是Aplysiatoxin衍生物，其具有式(I)、式(II)、式(III)中的任意一种化学结构：

式(I)

式(II)

式(III)

本发明解决上述技术问题所采用的另一个技术方案为：上述的提取物的提取方法，包括以下步骤：

⑴粗提物制备：将干燥的蓝藻Lyngbya majuscula粉碎后，采用有机溶剂A渗漉法进行提取得提取液，将提取液浓缩后得浸膏，将所得浸膏采用低级醇溶解后，再用有机溶剂B进行萃取，萃取液浓缩后得粗提物；

⑵分离：将步骤⑴中得到的粗提物经正向减压硅胶柱色谱VLC分离，洗脱后得到流分样品；

⑶纯化：将步骤⑵中得到的流分样品进行反相柱层析得到具有式(I)、式(II)、式(III)中的任意一种化学结构的Aplysiatoxin衍生物。

所述步骤⑴中的有机溶剂A为二氯甲烷和甲醇的混合溶液，体积比为二氯甲烷:甲醇＝2:1-1:1，V/V，所述步骤⑴中的有机溶剂A渗漉法进行提取的次数为至少一次；

所述步骤⑴中的低级醇为甲醇，所述甲醇体积浓度为60％-70％，V/V；

所述步骤⑴中的有机溶剂B为二氯甲烷，所述有机溶剂B萃取的次数为至少一次。

所述步骤⑵中正向减压硅胶柱色谱VLC所用正向硅胶为200-300目；所述步骤⑵中的洗脱方式为梯度洗脱，先用体积比分别为5:1，2:1，1:1，1:2，1:5，0:1，V/V的石油醚与乙酸乙酯的混合液逐步洗脱，最后用纯甲醇洗脱。

所述步骤⑶中的反相柱层析所采用的反相层析柱为Interchim Ruriflash 450系统，所述反相柱层析所使用的洗脱溶剂为乙腈的水溶液，所述乙腈的水溶液中乙腈与水的体积比为10:90-100:0。