[发明专利]一种生产羟基酪醇的方法在审
申请号: | 201811234787.2 | 申请日: | 2018-10-23 |
公开(公告)号: | CN109295113A | 公开(公告)日: | 2019-02-01 |
发明(设计)人: | 蔡宇杰;刘金彬;李朝智;丁彦蕊;白亚军;郑晓晖 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12P7/22 | 分类号: | C12P7/22;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 基因工程菌 羟基酪醇 重组菌 生物工程技术领域 谷氨酸 大肠杆菌基因组 氨基酸转氨酶 醇脱氢酶基因 重组大肠杆菌 脱羧酶基因 产物合成 生产效率 生物合成 基因 产业化 酶基因 底物 构建 敲除 酮酸 转运 应用 分解 生产 转化 | ||
1.一种生产羟基酪醇的方法,其特征在于,所述方法是利用一种大肠杆菌重组菌以L-多巴为底物生产羟基酪醇;所述大肠杆菌重组菌同时表达4种酶,分别为L-α-氨基酸转氨酶、L-谷氨酸脱氢酶、α-酮酸脱羧酶、醇脱氢酶,并在宿主大肠杆菌的基础上敲除了酚类化合物分解相关的基因。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述生产羟基酪醇化合物,是进行全细胞转化生产。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述全细胞转化生产的体系中,包括新鲜细胞湿重为1-200g/L,左旋多巴1-200g/L,L-谷氨酸1-200g/L。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述全细胞转化生产的体系中,pH 6.0-9.0。
5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于,所述全细胞转化生产的体系的温度为15-40℃。
6.根据权利要求3-5任一所述的方法,其特征在于,所述全细胞转化生产的体系的反应时间为1-48小时。
7.根据权利要求1-6任一所述的方法,其特征在于,所述大肠杆菌重组菌强化表达了谷氨酸转运基因、NAD合成基因、磷酸吡哆醛合成基因一种或者多种组合。
8.根据权利要求1-7任一所述的方法,其特征在于,所述酚类化合物分解相关的基因为hpaD、mhpB中的任意一种或者两种组合。
9.根据权利要求1-8任一所述的方法,其特征在于,所述大肠杆菌重组菌采用pRSFDuet-1和pETDuet-1双质粒共表达编码这4个酶的基因;pRSFDuet-1装载L-α-氨基酸转氨酶和L-谷氨酸脱氢酶,pETDuet-1装载α-酮酸脱羧酶和醇脱氢酶。
10.根据权利要求1-9任一所述的方法,其特征在于,所述大肠杆菌重组菌是将pRSFDuet-1和pETDuet-1质粒转化到宿主Escherichia coli B21感受态细胞中得到的。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江南大学,未经江南大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811234787.2/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。