[发明专利]一种生产羟基酪醇的方法在审

专利信息
申请号: 201811234787.2 申请日: 2018-10-23
公开(公告)号: CN109295113A 公开(公告)日: 2019-02-01
发明(设计)人: 蔡宇杰;刘金彬;李朝智;丁彦蕊;白亚军;郑晓晖 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12P7/22 分类号: C12P7/22;C12N1/21;C12R1/19
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 张勇
地址: 214000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 基因工程菌 羟基酪醇 重组菌 生物工程技术领域 谷氨酸 大肠杆菌基因组 氨基酸转氨酶 醇脱氢酶基因 重组大肠杆菌 脱羧酶基因 产物合成 生产效率 生物合成 基因 产业化 酶基因 底物 构建 敲除 酮酸 转运 应用 分解 生产 转化
【权利要求书】:

1.一种生产羟基酪醇的方法,其特征在于,所述方法是利用一种大肠杆菌重组菌以L-多巴为底物生产羟基酪醇;所述大肠杆菌重组菌同时表达4种酶,分别为L-α-氨基酸转氨酶、L-谷氨酸脱氢酶、α-酮酸脱羧酶、醇脱氢酶,并在宿主大肠杆菌的基础上敲除了酚类化合物分解相关的基因。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述生产羟基酪醇化合物,是进行全细胞转化生产。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述全细胞转化生产的体系中,包括新鲜细胞湿重为1-200g/L,左旋多巴1-200g/L,L-谷氨酸1-200g/L。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述全细胞转化生产的体系中,pH 6.0-9.0。

5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于,所述全细胞转化生产的体系的温度为15-40℃。

6.根据权利要求3-5任一所述的方法,其特征在于,所述全细胞转化生产的体系的反应时间为1-48小时。

7.根据权利要求1-6任一所述的方法,其特征在于,所述大肠杆菌重组菌强化表达了谷氨酸转运基因、NAD合成基因、磷酸吡哆醛合成基因一种或者多种组合。

8.根据权利要求1-7任一所述的方法,其特征在于,所述酚类化合物分解相关的基因为hpaD、mhpB中的任意一种或者两种组合。

9.根据权利要求1-8任一所述的方法,其特征在于,所述大肠杆菌重组菌采用pRSFDuet-1和pETDuet-1双质粒共表达编码这4个酶的基因;pRSFDuet-1装载L-α-氨基酸转氨酶和L-谷氨酸脱氢酶,pETDuet-1装载α-酮酸脱羧酶和醇脱氢酶。

10.根据权利要求1-9任一所述的方法,其特征在于,所述大肠杆菌重组菌是将pRSFDuet-1和pETDuet-1质粒转化到宿主Escherichia coli B21感受态细胞中得到的。

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