[发明专利]一种生物源二肽基肽酶-IV抑制剂的制备方法

权利要求书

1.一种生物源二肽基肽酶-IV抑制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将日本黄姑鱼鱼皮预处理得鱼皮粉，预处理工艺为：

（a）将鱼皮清洗后，冷冻干燥，粉碎至粒径为25~50μm，得鱼皮冷冻粉；

（b）将步骤（a）得到的鱼皮冷冻粉加入到0.10~0.50mol/L温控型碱性离子液体中，于不同温度条件下超声处理，离心、干燥，得去杂蛋白、脱脂后的鱼皮粉；然后将鱼皮粉置入2~5wt%的乙酸溶液中，按照每g鱼皮粉中加入0.01~0.03mg胃蛋白酶的添加量加入胃蛋白酶，于温度3~5℃条件下提取胶原蛋白，离心干燥，得日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白；

所述温控型碱性离子液体为双Ｎ－（２－二乙氨基）乙基聚乙二醇双咪唑氢氧根盐；

所述不同温度条件下超声处理的工艺为：先在20~25℃温度下，超声功率密度0.2~0.35w/cm²，超声处理10~20min；然后在10~15℃温度下，超声功率密度0.7~1.5w/cm²，超声处理5~8min；最后在然后在4~8℃温度下，超声功率密度2~2.5w/cm²，超声处理1~3min；

（2）利用复合酶对步骤（1）得到的日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白进行酶解，得日本黄姑鱼鱼皮胶原肽，所述复合酶为光响应凝胶因子改性木瓜蛋白酶；

（3）将日本黄姑鱼鱼皮胶原肽通过二肽基肽酶筛选试剂盒筛选，即得生物源二肽基肽酶-IV抑制剂。

2.根据权利要求1所述的一种生物源二肽基肽酶-IV抑制剂的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述酶解工艺为：在日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白中加入蒸馏水，然后加入光响应凝胶因子改性木瓜蛋白酶，搅拌均匀得混合液，将混合液置于紫外灯下，先打开紫外灯于紫外光照条件下搅拌反应1～2h；再关闭紫外灯，遮光于黑暗条件下，60~85℃条件下搅拌反应0.5~1h；反应结束后80～100℃灭活5～25min；再将反应液5000～8000rpm离心5～10min，收集上清，冷冻干燥得到日本黄姑鱼鱼皮胶原肽。