[发明专利]一种软组织修复补片及其制备方法

说明书

本发明公开了一种软组织修复补片及其制备方法，该修复补片包括：作为为细胞外基质的基底和天然蛋白外涂层，通过层层自组装技术表面修饰于细胞外基质上形成；所述的细胞外基质为猪小肠粘膜下层；所述的天然蛋白外为丝素蛋白，所述的丝素蛋白来源于蚕茧。通过层层自组装技术制备丝素蛋白表面功能化的复合脱细胞基质材料，具有力学性质和降解性能加强的性能。

技术领域

针对目前临床软组织修复生物补片的力学保持性问题，本发明涉及一种猪小肠粘膜下层脱细胞生物补片的力学加强技术，是基于蚕丝丝素蛋白层层自组装的表面修饰技术。

背景技术

目前，基于动物组织来源的脱细胞生物补片可诱导性修复多种软组织缺损，并显著降低了术后感染、异物反应与组织粘连的发生率，极大降低了临床不良反应的几率和严重程度，其潜在的治疗应用价值已经得到了极大的关注。因此，开发新型诱导组织再生的生物活性材料已成为当代生物医学材料的发展方向。

猪小肠粘膜下层(small intestinal submucosa，SIS)是一种富含活性因子的天然生物材料，主要由胶原蛋白，纤维蛋白，弹性蛋白以及一些生长因子和信号分子组成，具有优良的生物活性，在应用于多种组织缺损修复中，具体较突出的生物学优势，可获得组织结构和功能上的完整重建。近十余年来，国外采用SIS材料治疗多种临床疾病，治愈患者已超过上百万例，并已获得了良好的临床效果。但是在体内力学及酶等多种因素的作用下，SIS存在降解过快，导致其力学完整性丢失，不利于组织的重塑。

国内市场尽管已有少量的基于SIS的生物补片产品和功能敷料产品上市，要提高其临床疗效、扩大临床适用范围，还需要进一步优化材料设计，改进生产工艺技术，完善材料评价体系。基于SIS生物补片目前具的局限性，包括在体内环境下力学强度下降、力学保持性降低以及降解速率过快等。本项目根据生物补片和功能敷料的临床应用和产业化需求，通过建立具有天然蛋白表面功能化补片制备技术提高其力学强度和可控降解速率的功能。

所选取天然蛋白为FDA批准的丝素蛋白，丝素蛋白已在临床上被用作手术缝合线多年，相比于其他天然聚合物，丝素蛋白有着卓越的力学性能，良好的生物相容性，可控降解及可吸收性，容易加工，且来源广。本发明表面修饰技术采用丝素蛋白的层层自组装技术，丝素蛋白特有的氨基酸序列，使其在经过处理后诱发β-sheet二级结构形成，实现层层之间的连接。

发明内容

本发明内容针对现有软组织修复材料存在的问题和不足，提供一种新型脱细胞基质复合材料。该复合材料具有良好的生物活性、力学性能、可控降解性，安全无毒。

为了达到上述技术目的，本发明具体通过以下技术方案实现：

一种软组织修复补片，包括：

作为为细胞外基质的基底和天然蛋白外涂层，通过丝素蛋白层层自组装表面修饰于细胞外基质上形成；

所述的细胞外基质为猪小肠粘膜下层；

所述的天然蛋白外涂层为丝素蛋白，所述的丝素蛋白来源于蚕茧。

所述的丝素蛋白通过以下方法制备得到：

1)取一定量蚕丝，剪碎；

2)3L蒸馏水预热至100℃，加入0.02M Na₂CO₃；

3)缓慢将蚕丝加入，Na₂CO₃水溶液煮沸1h；

4)倒出蚕丝，用冷的蒸馏水冲洗；

5)重复(2)-(4)；

6)另取3L蒸馏水预热至100℃，将上述蚕丝沸水煮10min；

7)将上述步骤后获得的脱胶的蚕丝(丝素)用冷水冲洗，通风橱干燥，称重；