[发明专利]一株广谱抗噬菌体的大肠埃希氏菌BL21(DE3)-PR及其应用

说明书

本发明公开了一株广谱抗噬菌体的E.coli BL21‑(DE3)‑PR及其应用。本发明以工程菌株大肠埃希氏菌E.coli BL21(DE3)为亲本株成功筛选到一株重组蛋白表达菌株大肠埃希氏菌E.coli BL21(DE3)‑PR，该菌株能够抵抗可以裂解大肠埃希氏菌E.coli BL21(DE3)的噬菌体的侵染。本发明对重组蛋白表达菌株大肠埃希氏菌E.coli BL21(DE3)‑PR进行生长曲线和蛋白表达测定，结果表明该菌株的生长能力和蛋白表达能力与原出发菌株E.coli BL21(DE3)基本一致。

技术领域

本发明涉及一株广谱抗噬菌体的E.coli BL21-(DE3)-PR及其应用，具体涉及一株在生长及蛋白表达过程中不易受噬菌体感染的E.coli BL21-(DE3)-PR，属于生物工程领域。

背景技术

噬菌体是一类感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒，广泛存在于自然界中。由于噬菌体具有数量多，体积小，繁殖快和基因组的高度可塑性等特点，使得工业发酵过程极易受到噬菌体的感染。噬菌体感染具有普遍性和顽固性，发酵企业一旦受到其感染，损失是不可估量的，并且至今仍无应对良策。

pET系统使用T7启动子，是有史以来在大肠杆菌中克隆表达重组蛋白的功能最强大的系统，E.coli BL21(DE3)是pET系统的常用表达宿主菌，现已作为商品化产品被广泛应用。E.coli BL21(DE3)在工厂和实验室经常受到噬菌体感染，因此防治噬菌体感染问题亟需解决。

目前防治噬菌体感染的常见措施主要包括控制感染源，菌株轮换，传统的基因工程策略以及基于CRISPR/Cas系统的噬菌体防治策略等。其中通过自然突变筛选抗噬菌体菌株的方法由于其操作简单，效果显著而被广泛使用。但是目前各个工厂或者实验室使用的抗噬菌体菌株大多只能抵抗某一株或某一类噬菌体的感染，能够抵抗多株噬菌体感染的工程菌株依然值得挖掘。

发明内容

本发明的一个目的是提供一株大肠埃希氏菌Escherichia coli BL21(DE3)-PR。

本发明提供的大肠埃希氏菌Escherichia coli BL21(DE3)-PR的保藏编号为CGMCC No.16406。

本发明提供的大肠埃希氏菌Escherichia coli BL21(DE3)-PR的分类命名为大肠埃希氏菌Escherichia coli，该菌株已于2018年8月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏编号为CGMCC No.16406。

本发明的另一个目的是提供上述大肠埃希氏菌Escherichia coli BL21(DE3)-PR或其菌液或其代谢液或其培养液的新用途。

本发明提供了上述大肠埃希氏菌Escherichia coli BL21(DE3)-PR或其菌液或其代谢液或其培养液在抵抗噬菌体侵染和/或防治噬菌体感染中的应用。

本发明还提供了上述大肠埃希氏菌Escherichia coli BL21(DE3)-PR或其菌液或其代谢液或其培养液在制备抵抗噬菌体侵染和/或防治噬菌体感染的产品中的应用。

上述应用中，所述噬菌体为肌尾科噬菌体和/长尾科噬菌体。

进一步的，所述肌尾科噬菌体可为T4、vB_EcoM_IME281、vB_EcoM_IME338、vB_EcoM_IME339、vB_EcoM_IME340、vB_EcoM_IME341等肌尾科噬菌体，所述长尾科噬菌体可为T1、vB_EcoS_IME18、vB_EcoS_IME253、vB_EcoS_IME347、JMPW1、EEP等长尾科噬菌体。