[发明专利]一种检测生物素含量、叶酸含量和维生素B12含量的方法

说明书

本发明涉及食品检测技术领域，具体涉及一种检测生物素含量、叶酸含量和维生素B₁₂含量的方法，包括步骤一、提取样品的清液；步骤二、稀释标准品和样品清液；步骤三、培养稀释后的标准品和样品清液；步骤四、制定标准品的标准曲线和检测样品；该方法能同时提取生物素、叶酸和维生素B₁₂，从而提高了生物素、叶酸和维生素B₁₂的检测效率，具有易于操作和检测灵敏度高的优点。

技术领域

本发明涉及食品检测技术领域，具体涉及一种检测生物素含量、叶酸含量和维生素B₁₂含量的方法。

背景技术

生物素、叶酸和维生素B₁₂是维持人体自然生长、发育和正常人体机能健康所必要的营养素，因此，食品中的生物素含量、叶酸含量和维生素B₁₂含量的越来越受人们的关注，尤其是对于婴幼儿食品和乳品中维生素B₁₂的测定也是至关重要。由于生物素含量、叶酸含量和维生素B₁₂为不同结构的物质，且现在大多数食品是将生物素、叶酸和维生素B₁₂作为营养强化剂认为添加到食品中。现有技术中分别采用标准GB 5009.259-2016测定生物素、采用标准GB 5009.211-2014测定叶酸、标准GB 5413.14-2010测定维生素B₁₂。可见，上述的测定标准都是独立进行的，即，测定一种物质含量时，需要分别提取测生物素、叶酸和维生素B₁₂，因此，会导致测定生物素含量、叶酸含量和维生素B₁₂含量时需要单独进行3次独立的提取样品，这样不但影响检测效率，还浪费检测成本。

发明内容

针对现有技术存在上述技术问题，本发明目的在于提供一种检测生物素含量、叶酸含量和维生素B₁₂含量的方法，该方法能同时提取生物素、叶酸和维生素B₁₂，从而提高了生物素、叶酸和维生素B₁₂的检测效率，且具有易于操作和检测灵敏度高的优点。

为实现上述目的，本发明提供以下技术方案：

提供一种检测生物素含量、叶酸含量和维生素B₁₂含量的方法，包括以下步骤：

步骤一、提取样品的清液

(1)称取样品至离心管中，先向离心管加入预热的磷酸钾缓冲溶液，使样品充分溶解，再加入磷酸钾缓冲溶液，使得样品与磷酸钾缓冲溶液的重量之比是1：35～45；

(2)将上述(1)的离心管沸水浴处理，沸水浴时震荡所述离心管，沸水浴时间为25～40min，得到样品与磷酸钾缓冲溶液混合液；

(3)将上述(2)的离心管冰水浴处理，使样品与磷酸钾缓冲溶液混合液冷却至3～5℃；

(4)采用离心机并将其冷却至3～5℃，然后把上述(3)中冷却后的离心管置入所述离心机进行离心处理，得到上层脂肪、中层清液和下层沉淀；

步骤二、稀释

(3)稀释样品清液：量取三份清液，该三份清液分别是测定生物素的清液、测定叶酸的清液和测定维生素B₁₂的清液，然后分别稀释该三份清液，得到三份样品稀释液，该三份样品稀释液的含量对应在生物素标准曲线范围内、在叶酸标准曲线范围内及维生素B₁₂标准曲线范围内，且稀释后的清液容积不少于500μL；

(4)稀释标准品：分别采用生物素标准品、叶酸标准品和维生素B₁₂标准品并将其分别稀释为不同含量

步骤三、培养