[发明专利]一种兽用狂犬病毒中和抗体化学发光检测试剂盒

权利要求书

1.一种兽用狂犬病毒中和抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括包被了狂犬病毒抗原的毛细管、酶结合物、发光底物和清洗液。

2.根据权利要求1所述的一种兽用狂犬病毒中和抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述狂犬病毒抗原为自身带有活性基团或经过修饰获得活性基团的狂犬病毒G蛋白重组抗原、灭活狂犬病全病毒或狂犬病毒病毒样颗粒。

3.根据权利要求1所述的一种兽用狂犬病毒中和抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述毛细管上带有氨基、羧基、羟基、巯基、醛基、环氧基、氰酸酯基、异氰酸酯基、氰基、异氰基、马来酰胺氨基、N-羟基琥珀酰亚胺酯基、酚羟基或者酚羟基衍生基团中的一种。

4.根据权利要求1所述的一种兽用狂犬病毒中和抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述包被了狂犬病毒抗原的毛细管通过如下方法制成：该方法包括修饰毛细管步骤，修饰狂犬病毒G蛋白重组抗原、灭活狂犬病全病毒或狂犬病毒病毒样颗粒步骤，包被步骤和封闭步骤；

所述修饰毛细管步骤具体为：利用修饰剂修饰毛细管，使得毛细管上带有氨基、羧基、羟基、巯基、醛基、环氧基、氰酸酯基、异氰酸酯基、氰基、异氰基、马来酰胺氨基、N-羟基琥珀酰亚胺酯基、酚羟基或者酚羟基衍生基团中的一种；

所述修饰狂犬病毒G蛋白重组抗原、灭活狂犬病全病毒或狂犬病毒病毒样颗粒步骤具体为：利用修饰剂修饰狂犬病毒G蛋白重组抗原、灭活狂犬病全病毒或狂犬病毒病毒样颗粒，使得狂犬病毒G蛋白重组抗原、灭活狂犬病全病毒或狂犬病毒病毒样颗粒连上氨基、羧基、巯基或羟基；

所述包被步骤具体为：

活化：活化的方式有三种：第一种：用偶联剂活化修饰后的毛细管，第二种：用偶联剂活化修饰后的狂犬病毒G蛋白重组抗原、灭活狂犬病全病毒或狂犬病毒病毒样颗粒，第三种，在包被液中加入偶联剂；

配制包被液：当活化采用第一种方式，配制包被液具体为：将修饰后的狂犬病毒G蛋白重组抗原、灭活狂犬病全病毒或狂犬病毒病毒样颗粒稀释至为5～30µg/mL，制成包被液Ⅰ；当活化采用第二种方式，配制包被液具体为：将活化后的狂犬病毒G蛋白重组抗原、灭活狂犬病全病毒或狂犬病毒病毒样颗粒稀释至为5～30µg/mL，制成包被液Ⅱ；当活化采用第三种方式，配制包被液具体为：将偶联剂和缓冲液混合制成活化缓冲液，然后用活化缓冲液将修饰后的狂犬病毒G蛋白重组抗原、灭活狂犬病全病毒或狂犬病毒病毒样颗粒稀释至为5～30µg/mL，制成包被液Ⅲ；

偶联：当活化采用第一种方式，具体的偶联为：将活化后的毛细管浸泡在包被液Ⅰ中，偶联完成后，清洗并干燥毛细管，获得包被了狂犬病毒抗原的毛细管；当活化采用第二种方式，具体的偶联为：将修饰后的毛细管浸泡在包被液Ⅱ中，偶联完成后，清洗并干燥毛细管，获得包被了狂犬病毒抗原的毛细管；当活化采用第三种方式，具体的偶联为：将修饰后的毛细管浸泡在包被液Ⅲ中，偶联完成后，清洗并干燥毛细管，获得包被了狂犬病毒抗原的毛细管；

所述封闭步骤具体为：用BSA或脱脂奶粉溶于Tris-HCl中，制成封闭液；将包被后的毛细管浸泡在封闭液中，封闭2～4 h后，清洗并干燥毛细管。

5.根据权利要求4所述的一种兽用狂犬病毒中和抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述封闭步骤中，所述封闭液中，BSA或脱脂奶粉的质量体积百分比为1～5%，Tris-HCl的浓度为0.01～0.1M，封闭液的pH为7.2～7.8，封闭温度为37 ℃。