[发明专利]通过引物组合物用于进行缬沙坦个体化用药指导的方法

权利要求书

1.一种通过如下所述的引物组合物，用于进行降高血压药物缬沙坦个体化用药指导的方法，该引物组合包括针对能判别用药型的3个SNP标记的PCR引物对和延伸引物，其中，PCR引物序列对选自如SEQ ID NO:1a-3a所示的序列，延伸引物序列选自如SEQ ID NO:1b-3b所示的序列。

2.权利要求1的方法，其中该引物组合物分为2个独立进行的多重PCR反应引物组合物，并且所述序列如下所示：

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3.权利要求2所述的方法，其中各位点对应的延伸引物及延伸产物分子量如下所示：

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4.权利要求3所述的方法，其中上述PCR引物序列为核心序列，其在5'端可包括5-15个保护碱基序列，优选为10bp的tag：ACGTTGGATG。

5.权利要求3所述的方法，其中延伸引物5'端可增加作为接头的碱基序列，优选接头碱基序列为1-15个碱基。

6.权利要求5所述的方法，其中接头碱基序列为1-3个碱基。

7.权利要求1-6任一所述的方法，其中包括以下步骤：

(1)多重PCR：使用上述PCR引物对，在两个反应体系中，对上述3个SNP位点所在DNA区域同时进行扩增，得到含3处多态位点所在DNA区域的PCR产物；

(2)PCR产物纯化：对步骤(1)得到的PCR产物进行纯化，以减少对后续反应的干扰；

(3)单碱基延伸：使用上述3条特异性的延伸引物，在两个反应体系中，对步骤(2)得到的纯化后PCR产物进行多重单碱基延伸，延伸引物在对应的SNP位点处延伸一个核苷酸，该核苷酸与SNP位点处的基因型互补配对；

(4)延伸产物纯化：对步骤(3)得到的延伸产物进行纯化，以获得高纯的延伸产物，避免盐离子等杂质对后续检测的影响；

(5)质谱仪检测：将步骤(4)得到的纯化产物点在含有基质的靶片上，放入质谱仪进行检测。

8.权利要求7的方法，其中步骤2的纯化过程可以选自碱性磷酸酶消化、碱性磷酸酶和外切酶ExoI消化、切胶纯化、PCR纯化柱过柱。