[发明专利]一种发酵制备长链二元酸的方法

权利要求书

1.一种发酵制备长链二元酸的方法，其特征在于包括以下内容：

（1）种子液制备：将长链二元酸发酵菌培养获得种子液；

（2）烷烃预处理：在烷烃中加入脂肪酸和水，进行超声处理，获得胶团状烷烃；所述脂肪酸为具有10～18个碳原子的脂肪酸，所述的烷烃为具有10～16个碳原子的烷烃；

（3）长链二元酸发酵：将预处理后烷烃、种子液加入发酵培养基中，采用区间调控pH值的方式进行发酵，直至发酵结束；采用区间调控pH值的方式具体为：发酵起始，将发酵体系pH值控制在5～6，24h后将体系pH控制在6.8～8.0。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的长链二元酸发酵菌为具有完整α、ω-氧化途径的假丝酵母属、隐球酵母属、内孢霉属、汉逊氏酵母属、毕赤氏酵母属、红酵母属、球拟酵母属或丝孢酵母属中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的长链二元酸发酵菌为热带假丝酵母菌。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）将活化的发酵菌接种至种子培养基中，接种体积比为3%～10%，培养温度为25～37℃，培养时间15～24小时。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：接种体积比为5%～10%，培养温度28～32℃。

6.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于：步骤（1）制备种子液的种子培养基的配方为：蔗糖30～45g/L、玉米浆1.5～2g/L、酵母膏1.5～1.8g/L、氯化钠0.8～1.2g/L、磷酸二氢钾3.5～7.5g/L、硫酸镁1.2～1.8g/L、尿素1.2～4.8g/L。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述烷烃用量为发酵液总体积的15%～30%。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述的烷烃用量为发酵液总体积的20%～25%。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述脂肪酸的添加量为烷烃重量的0.5%～2%。

10.根据权利要求1或9所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述脂肪酸是油酸、亚油酸、蓖麻油酸、亚麻酸中的至少一种。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述脂肪酸是油酸或亚油酸。

12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）在加入脂肪酸的同时加入磷脂，添加量为脂肪酸质量的1%～5%。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于：所述磷脂是磷脂酰甘油、二磷脂酰甘油中的至少一种，添加量为脂肪酸质量的2%～5%。

14.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述水的添加量为烷烃重量的1～2.5倍。

15.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）超声处理的频率为25～40kHz，超声功率密度为10～100W/L，时间为10～30分钟。

16.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）发酵种子液的接种体积比为2%～20%，发酵温度为25～37℃，搅拌转速为120～500rpm，通气量为0.2～1.0VVM，发酵时间为138～144小时。

17.根据权利要求16所述的方法，其特征在于：步骤（3）发酵种子液的接种体积比为10%～20%，发酵温度为28～32℃，搅拌转速为200～400rpm，通气量为0.5～1.0VVM。