[发明专利]一种甘油发酵生产1，3-丙二醇的方法

权利要求书

1.一种甘油发酵生产1，3-丙二醇的方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）发酵菌种培养：在微氧条件下进行发酵菌种的培养，获得发酵种子液；所述的发酵菌为能够利用甘油发酵生产1，3-丙二醇的克雷伯杆菌（Klebsiella pneumoniae）；

（2）微藻培养：在自养条件下进行微藻培养，获得微藻种子液；所述的微藻为纤维藻（Ankistrodesmus sp .）SS-B7或小球藻(Chlorella sp.) SF-B1；

（3）发酵过程：在发酵培养基中接入发酵种子液，在微氧条件下进行发酵，发酵至乙酸浓度大于3g/L时加入微藻种子液，培养至发酵结束；发酵过程中流加甘油使发酵体系中甘油浓度控制在20g/L～40g/L；

（4）将终止发酵液pH调至碱性，静置分层后获得含有1，3-丙二醇的发酵清液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）将活化的发酵菌接种至种子培养基中，接种体积比为3%～10%，培养温度为25～40℃，pH值为6～9。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：接种体积比为5%～10%，培养温度为35～40℃，pH值为6.5～7.2。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述的微氧条件采用的通气量小于0.1vvm。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：采用的通气量为0.02～0.08vvm。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述微藻培养的培养基采用BG11、SE或BBM培养微藻的液体培养基，自养培养条件为：光照强度2000Lux～7000Lux，光暗时间比为7:5～2:1，pH值为7～9，温度为25～40℃，通气中CO₂含量3v%～10v%；培养至微藻种子液中藻细胞干重达到5g/L～20g/L。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述培养基采用BG11培养基。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）发酵种子液的接种体积比为2%～20%，空气通气量小于0.1vvm；发酵条件为：发酵温度为30～42℃，搅拌转速为100～500rpm，pH控制为6～7.5。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：发酵种子液的接种体积比为10%～15%，空气通气量为0～0.05vvm；发酵条件为：发酵温度为35～40℃，搅拌转速为200～400rpm，pH控制为6.8～7.2。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）微藻种子液的加入体积比为2%～20%。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于：微藻种子液的加入体积比为5%～10%。

12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：加入微藻种子液后，pH控制在7.5～8.5。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于：pH控制在7.5～8。

14.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）发酵结束后，将终止发酵液pH调至8.5～10。

15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于：将终止发酵液pH调至8.5～9.5。