[发明专利]一种高产L-亮氨酸的谷氨酸棒杆菌重组菌及其构建方法在审
| 申请号： | 201811256384.8 | 申请日： | 2018-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN109294966A | 公开（公告）日： | 2019-02-01 |
| 发明（设计）人： | 张伟国;钱和;王颖妤 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/77;C12P13/06;C12R1/15 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 亮氨酸 谷氨酸棒杆菌 重组菌 构建 合成途径 依赖型 积累 支链氨基酸转氨酶 基因工程领域 亮氨酸脱氢酶 球形芽孢杆菌 应用基因工程 高产 出发菌株 合成能力 摇瓶发酵 重组菌株 产生菌 辅因子 高产菌 供应量 最大比 菌株 替换 生长 改造 成功 | ||
【权利要求书】：
1.一种谷氨酸棒杆菌重组菌，其特征在于，所述重组菌是在生产L-亮氨酸的谷氨酸棒杆菌中异源表达了芽孢杆菌属来源的亮氨酸脱氢酶。
2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述生产L-亮氨酸的谷氨酸棒杆菌为蛋氨酸和异亮氨酸缺陷型，同时具有α-噻唑丙氨酸和α-氨基丁酸抗性的谷氨酸棒杆菌。
3.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述芽孢杆菌属为球形芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌或嗜热脂肪芽孢杆菌。
4.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述亮氨酸脱氢酶为以下任一：
(1)氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；
(2)与SEQ ID NO.1所示氨基酸序列具有80％以上同源性，且具有亮氨酸脱氢酶活性。
5.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述亮氨酸脱氢酶的插入位置为支链氨基酸转氨酶的编码基因ilvE基因编码序列中间，实现部分缺失ilvE编码基因同时表达亮氨酸脱氢酶。
6.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述表达是以pK18mobsacB作为表达载体。
7.权利要求1～6任一项所述的重组菌的构建方法。
8.一种发酵生产L-亮氨酸的方法，其特征在于，所述方法利用权利要求1～6任一所述的重组菌。
9.权利要求1-6任一所述的重组菌的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述应用是应用在饲料工业、医药工业或食品工业中。
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