[发明专利]一种新型信号放大-毛细管化学发光免疫传感器

权利要求书

1.一种新型信号放大-毛细管化学发光免疫传感器，它是由下述方法制备的：

1）毛细管预处理：依次用0.1M HCl、0.1M NaOH清洗毛细管，清洗时间分别为15~25min和55~65min，用水清洗、N₂吹干，通入体积分数为0.5~1.5%氨丙基二乙氧基甲基硅烷的甲苯溶液，用甲苯清洗、N₂吹干，通入2~3% 戊二醛水溶液；

2）抗体Ab₁的固定：向步骤1）预处理的毛细管中，通入38~45 µg/mL甲胎蛋白抗体Ab₁，两端封口，置于4℃下过夜，用摩尔质量0.1M 、pH为7.4 的PBS溶液洗去未结合的甲胎蛋白抗体Ab₁；

3）消除非特异性吸附：通入10mg/mL 氧化型谷胱甘肽溶液至毛细管中，两端封口，室温放置1.5~2.5h；将毛细管截为多根，每根毛细管长度为5~7cm。

2.根据权利要求1所述的一种新型信号放大-毛细管化学发光免疫传感器，其特征在于：步骤1）所述的毛细管预处理，通入体积分数为1%氨丙基二乙氧基甲基硅烷的甲苯溶液；通入2.5% 戊二醛水溶液。

3.根据权利要求2所述的一种新型信号放大-毛细管化学发光免疫传感器，其特征在于：步骤2）所述的抗体Ab₁的固定，通入40µg/mL甲胎蛋白抗体Ab₁。

4.根据权利要求1、2或3所述的一种新型信号放大-毛细管化学发光免疫传感器，其特征在于：步骤3）所述的每根毛细管长度为6cm，并设有2厘米长的窗口。

5.权利要求1所述的一种新型信号放大-毛细管化学发光免疫传感器在检测降钙素原方面的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：

1）将待测样品溶液通入权利要求1所述的一种新型信号放大-毛细管化学发光免疫传感器中，在36~37.5℃下免疫反应55~65min，PBST溶液冲洗；

2）将生物素标记的降钙素原抗体通入传感器中，在36~37.5℃下免疫反应55~65min，PBST溶液洗去未结合的B-Ab₂；

3）将链霉亲和素和生物素标记辣根过氧化酶形成的复合物溶液通入传感器中，36~37.5℃下孵育30min， PBST溶液洗去未结合的复合物溶液；

4）将传感器插入毛细管支架中，并将传感器的一端浸入含有化学发光底物的溶液中，进行化学发光信号的数据采集；

5）测得的化学发光强度代入降钙素原抗原标准曲线，求出实际样品中降钙素原抗原浓度。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述的免疫反应，是在37℃下免疫反应60min。

8. 根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述的PBST溶液，是含有体积分数为0.05% Tween-20的PBS溶液。

9.根据权利要求6、7或8所述的应用，其特征在于：步骤4）所述的含有化学发光底物的溶液，是取鲁米诺和双氧水各10μL，即时混合得到的溶液。