[发明专利]miR-92b及其模拟物在促进骨髓间充质干细胞成骨分化及骨形成中的应用

说明书

本发明公开了miR‑92b及其模拟物在促进骨髓间充质干细胞成骨分化及骨形成中的应用。本发明通过离体实验探究miR‑92b对骨髓间充质干细胞成骨分化及骨形成的调控作用。证明了miR‑92b可以通过促进成骨细胞钙结节的形成和标志性酶ALP活性，以及促进成骨分化过程中重要调控转录因子Runx2的表达来提高骨髓间充质干细胞成骨分化的能力以及促进在体骨形成。本发明的提出为治疗骨质疏松提供了新的技术手段。

技术领域

本发明涉及miR-92b的新的治疗用途，特别涉及miR-92b及其模拟物在促进骨髓间充质干细胞成骨分化及骨形成中的应用。本发明属于医药技术领域。

背景技术

骨质疏松即骨质疏松症，是一种由多种原因引起的以单位体积内的骨量减少为特征的代谢性骨病变。该种疾病见于绝经后妇女与老年人，常表现为骨骼疼痛，骨脆性增加，容易发生骨折，对人体造成严重伤害。目前可通过饮食控制、运动以及适当补充钙剂、维生素D来改善轻度病症，而对于已有骨质疏松迹象或已发生过骨折者，常采用抗骨吸收或促进骨形成的药物来改善症状，严重者需同时辅以外科手术进行固定复位。这些传统的治疗方法在临床应用中均有一定的局限性与创伤性，并发症较多，故探究并发现一种新的治疗方式变得尤为重要。

骨髓间充质干细胞(BMSCs)是人们在哺乳动物的骨髓基质中发现的一种具有分化形成骨、软骨、脂肪、神经及成肌细胞的多种分化潜能的细胞亚群。并且在骨髓基质中，存在向成骨细胞(增加骨量)及破骨细胞(促进骨吸收)分化的动态平衡体系。而骨质疏松症的发生正是因为骨髓基质中骨量的异常(即骨细胞的平衡体系被打破)而导致的，所以可通过促进骨髓基质中间充质干细胞向成骨细胞分化，增加骨密度来治疗骨质疏松。

微小RNA(MicroRNA/miRNA)是一类在进化上高度保守，长度约为22nt单链小分子非编码RNA，参与转录后的基因调控。有研究表明，其对间充质干细胞的分化过程具有重要的调控作用。我们经实验验证miR-92b促进离体水平骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化，并促进在体骨形成。因此，本发明的提出为治疗骨质疏松提供了新的技术手段。

发明内容

本发明的目的在于探究miR-92b是否具有促进骨髓间充质干细胞向成骨分化以及在体骨形成的潜能，从而为骨质疏松的治疗提供新的技术手段。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：

本发明通过离体实验探究miR-92b对骨髓间充质干细胞成骨分化及骨形成的调控作用。首先通过离体培养C57BL/6小鼠来源的骨髓间充质干细胞(BMSCs)并转染miR-92bmimic(过表达miR-92b)、miR-92b AMO(敲减miR-92b)、mimic-NC(过表达对照组)及AMO-NC(敲减对照组)，随后利用成骨诱导培养液诱导。检测(1)成骨诱导14天，进行茜素红染色和碱性磷酸酶染色，检测miR-92b对BMSCs成骨分化能力的影响；其结果显示miR-92b mimic可以通过促进成骨细胞钙结节的形成和标志性酶ALP活性，即miR-92b能够提高骨髓间充质干细胞成骨分化的能力；(2)成骨诱导3天，进行Runx2免疫荧光染色，其结果显示miR-92b能够促进成骨分化过程中重要调控转录因子Runx2的表达。

因此，在上述研究的基础上，本发明提出了miR-92b及其模拟物在制备促进骨髓间充质干细胞成骨分化及骨形成药物中的应用。

相较于现有技术，本发明的有益效果在于：

本发明公开了miR-92b及其模拟物具有促进骨髓间充质干细胞成骨分化及在体骨形成的作用，为治疗骨质疏松症提供了新的技术手段。

附图说明

图1为miR-92b调控骨髓间充质干细胞的成骨分化的茜素红染色结果。