[发明专利]一种侧流层析试纸及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种侧流层析试纸，包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸、埋有疏水棉线的纸张和背胶板；样品垫、结合垫、埋有疏水棉线的纸张、硝酸纤维素膜和吸水纸按照顺序依次两两相重叠2mm固定贴在背胶板上将具有一定疏水性质的棉线在造纸过程中埋入纸张，将两者复合作为流体通道添加到传统侧流层析试纸的硝酸纤维素膜前面，改变试纸条结构，减慢目标物在硝酸纤维素膜上的流速，延长目标物与探针的反应时间，从而增强检测灵敏度。其中所采用的棉线为生活中常见的纺织材料，廉价易得，采用与纸张类似的纤维材料制备而成；且通过传统的造纸工艺将棉线和纸复合，操作简单快速，有望实现批量化生产，用于HIV核酸检测。

技术领域

本发明属于试纸制备领域，具体涉及一种增强侧流试纸灵敏度的方法和应用。

背景技术

随着传染病、食物污染和水污染的发生率不断增加，医学诊断、环境监测和食品安全测试等应用显得越来越重要，而他们主要是对体液和其他生物化学流体中的分析物例如核酸，蛋白质，药物和代谢物等的检测。传统方法是在实验室中对样品进行定量分析，但是往往需要大型的，昂贵的分析仪器，而且需要有相应专业技术的人员操作，同时对样品的需求量也很大，这在基础设施不良的发展中国家和欠发达地区，或者紧急情况，亦或是家庭健康检测是很难实施。侧流层析试纸作为一种即时检测技术，已经被应用于资源受限地区进行疾病诊断，食品安全检测和环境检测等领域。与传统实验室分析技术相比，侧流层析试纸具有操作简单、成本低廉、便于携带等优点。目前，这种方法已被用于检测病毒、细菌、细胞和人血样中不同核酸和蛋白标志物。但是，低灵敏度在一定程度上限制了侧流层析试纸的广泛应用。

目前，已有很多方法用来增强试纸检测灵敏度，例如：基于酶的信号增强技术、基于探针的信号增强技术和恒温恒湿技术等。它们往往需要昂贵的化学试剂、大型仪器、复杂的制备过程或操作步骤。研究发现，通过对样品进行前期预处理可以增强试纸检测灵敏度，如等速电泳技术分离和纸基浓缩技术；亦可通过改变试纸上液体的流速提升其检测灵敏度，如利用石蜡等疏水性物质修饰硝酸纤维素膜，制备疏水屏障。上述方法存在制备复杂，操作繁琐，成本较高，受环境影响大且不能批量化生产等缺点，仍然不适用于提高侧流层析试纸的灵敏度，不能广泛用于资源匮乏地区。

发明内容

为了解决了现有技术中存在的问题，本发明提供一种侧流层析试纸及其制备方法和应用，本发明所述侧流层析试纸，有效减缓目标物在硝酸纤维素膜上的流速，增加检测目标物与硝酸纤维素膜上固定的捕获探针和对照探针的反应时间，从而提高检测灵敏度，侧流层析试纸制备方法操作简单、成本低廉，且有望实现批量化生产，适用范围广。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是，一种侧流层析试纸，包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸、埋有疏水棉线的纸张和背胶板；样品垫、结合垫、埋有疏水棉线的纸张、硝酸纤维素膜和吸水纸按照顺序依次两两相重叠2mm固定贴在背胶板上。

一种侧流层析试纸的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，取市售棉线，采用十六烷基三甲氧基硅烷溶液对棉线进行预处理，得到疏水棉线；

步骤2，取针叶木纤维并进行疏解，使纤维均匀分散，形成纸浆悬浮液，将步骤1处理过的棉线放置于纸张成型网上，向纸张成形器中加入所述纸浆悬浮液，脱水形成湿纸页，再将湿纸页干燥得到埋有疏水棉线的纸张。

步骤3，取样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸、步骤2所制备的埋有疏水棉线的纸张和背胶板，将样品垫、结合垫、埋有疏水棉线的纸张、硝酸纤维素膜和吸水纸按照顺序依次两两相重叠贴在背胶板上，即得到侧流层析试纸。

步骤中，在浓度为0.01wt％～0.25wt％的十六烷基三甲氧基硅烷溶液中将棉线浸泡20min～30min，清洗干净后烘干。

步骤1中所用的十六烷基三甲氧基硅烷溶液用乙醇稀释，并加入催化剂乙酸。

乙醇和乙酸的体积比为9:1。