[发明专利]一种富含呋喃构型的半乳甘露聚糖及其制备方法

权利要求书

1.一种富含呋喃构型的半乳甘露聚糖，其特征在于，半乳甘露聚糖从金蝉花孢子体中分离纯化得到，由甘露糖、葡糖糖、半乳糖和阿拉伯糖按摩尔比1:5:2.5:1聚合组成，分子量为1.8kDa。

2.根据权利要求1所述的富含呋喃构型的半乳甘露聚糖，其特征在于，所述半乳甘露聚糖的分子链连接方式为：→2)-α-D-Manp(1→,→6)-α-D-Manp(1→,→4)-α-D-Glcp(1→,→2,4)-α-D-Glcp(1→,→5)-β-D-Galf(1→,→2)-β-D-Galf(1→,，摩尔比例依次为1:1.3:8:2:3:2。

3.一种如权利要求1或2所述的富含呋喃构型的半乳甘露聚糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将金蝉花孢子体粉碎后过筛、丙酮脱脂；

（2）取脱脂后的金蝉花孢子体加水后浸提，然后离心得上清液；

（3）如步骤（2）反复浸提金蝉花孢子体，并合并离心后的上清液得到浸提溶液；

（4）将步骤（3）所得浸提溶液减压浓缩，先加入低浓度乙醇溶液沉淀，离心去除沉淀后加入高浓度乙醇溶液沉淀，离心分离得到初产物；

（5）将分离后的初产物用水溶解，依次脱除蛋白质、透析除盐，然后冷冻干燥得粗糖；

（6）将粗糖溶解后置于强阴离子交换柱Q Sepharose TMFast Flow上分离；

（7）采用氯化钠溶液依次梯度洗脱，收集洗脱液并硫酸-苯酚法检测，选取吸光度最大的洗脱峰所在的洗脱液蒸发浓缩、干燥得到终产物。

4.根据权利要求3所述的富含呋喃构型的半乳甘露聚糖的制备方法，其特征在于，浸提过程中，金蝉花孢子体与水的质量体积比1g:20～30mL，浸提温度96～100℃，浸提时间4～5h，反复浸提2～5次。

5.根据权利要求3或4所述的富含呋喃构型的半乳甘露聚糖的制备方法，其特征在于，步骤（4）中低浓度乙醇溶液的浓度为40wt%～45wt%，加入体积为浓缩浸提液的4～6倍，高浓度乙醇溶液浓度为77wt%～80wt%，加入体积为去除沉淀后的溶液的4～6倍。

6.根据权利要求3或4所述的富含呋喃构型的半乳甘露聚糖的制备方法，其特征在于，步骤（5）中采用Sevag法脱除蛋白质，采用截留分子量3500Da的透析袋透析除盐。

7.根据权利要求3或4所述的富含呋喃构型的半乳甘露糖的制备方法，其特征在于，步骤（6）的分离过程如下：将50mg的粗糖产物溶解在1～2mL的去离子水中，然后0.45μm微滤膜过滤，再上样分离，上样速度为1ml/min。

8.根据权利要求3所述的富含呋喃构型的半乳甘露聚糖的制备方法，其特征在于，步骤（7）的洗脱过程如下：将不同浓度NaCl溶液按从低浓度向高浓度依次分梯度洗脱分离柱，NaCl溶液浓度梯度为：0、0.1 mol/L、0.25 mol/L、0.5 mol/L，洗脱流速为3mL/min，各个梯度收集2～3倍柱体积的洗脱液。

9.根据权利要求3或8所述的富含呋喃构型的半乳甘露聚糖的制备方法，其特征在于，硫酸-苯酚法检测的波长为490nm。