[发明专利]量子点荧光微球及其制备方法

说明书

本发明涉及量子点荧光微球及其制备方法。该制备方法包括以下步骤：采用将油溶性量子点通过配体交换或者包覆双亲性聚合物的方法或者直接在水相中合成的方法制备表面修饰有活性基团的水相量子点；将微球活化，得到具有与活性量子点表面活性基团反应的基团的活性微球；将表面修饰有活性基团的水相量子点和活性微球发生共价键合反应，得到所述量子点荧光微球；其中，所述活性微球具有与所述活性基团反应的基团。上述制备方法通过活性基团与活性微球发生共价键合反应，大大提高了量子点与微球之间的连接稳定性，提高了荧光强度及荧光强度的稳定性，长期保证其满足检测的需求。

技术领域

本发明涉及生物分子标记技术领域，特别是涉及一种量子点荧光微球及其制备方法。

背景技术

基于荧光微球的液态悬浮芯片技术具有对同一种样品中的多种蛋白、细胞因子等进行同时筛选和定量的能力，在疾病诊断领域具有很高的研究和应用价值。液态悬浮芯片技术的核心是在检测过程具有独特标记信号的编码微球，为了使荧光编码微球能够应用于高通量的多指标检测体系，这要求制备的荧光微球具有高荧光强度、尺寸均一、表面易于功能化、生物相容性好等特点。

目前荧光微球主要使用有机荧光染料制备得到的，该制备方法是将荧光染料通过溶胀进入聚苯乙烯等高分子微球载体，亦或者将有机染料标记在各种微球表面而获得。但有机荧光染料本身易降解、光漂白等缺点，这使得有机荧光染料远远不能满足生物检测的需求。相比于其他发光材料，量子点因具有宽激发谱、窄发射谱、发射波长可通过尺寸调节等优点而被认为是理想的荧光编码材料。现阶段的量子点荧光微球主要将量子点溶胀进入聚合物微球制备得到，但量子点容易从微球内部泄露出来，造成微球自身荧光强弱的变化，也使得溶胀方式制备的量子点荧光微球无法实际运用于生物检测。

发明内容

鉴于上述技术的缺陷，本发明提供一种量子点与微球之间通过共价键合的方式结合在一起，优点在于量子点可以牢靠的固定在微球表面，不会从微球上脱离，从而保证制备的量子点荧光微球自身荧光信号不会发生变化，使得制备的量子点荧光微球具有高荧光强度、高荧光强度稳定性。

也就是说，基于此，有必要提供一种具有高荧光强度、高荧光强度稳定性的量子点荧光微球及其制备方法。

一种量子点荧光微球的制备方法，包括以下步骤：

步骤一：采用将油溶性量子点通过配体交换或者包覆双亲性聚合物的方法或者直接在水相中合成的方法制备表面修饰有活性基团的水相量子点；

步骤二：将微球活化，得到具有与活性量子点表面活性基团反应的基团的活性微球；

步骤三：将所述表面修饰有活性基团的水相量子点和所述活性微球于溶剂中发生共价键合反应，得到所述量子点荧光微球，其中，所述活性微球具有与所述活性基团反应的基团。

上述制备方法及制得的量子点荧光微球，通过量子点表面活性基团与活性微球发生共价键合反应，大大提高了量子点与微球之间的连接稳定性；量子点可以牢靠的固定在微球表面，不会从微球上脱离，从而保证制备的量子点荧光微球自身荧光信号不会发生变化，使得制备的量子点荧光微球具有高荧光强度、高荧光强度稳定性。

本发明通过研究发现，相比传统的溶胀法荧光微球的制备方法，该制备方法制得的量子点荧光微球具有标记的荧光强度高等优点，非常便于进行荧光编码，避免了传统制备方法制得的荧光编码微球的荧光强度无法满足要求的缺点。

在其中一个实施例中，所述水相量子点表面修饰有羧基、氨基和羟基中的至少一种活性基团；所述活性微球具有羧基、氨基、氯基、环氧基、异氰酸、丁二酸酐基或氯磺酰苯基。

在其中一个实施例中，所述步骤二具体为：将微球与硅烷试剂及溶剂混合进行活化，得到活性微球。

在其中一个实施例中，所述微球为具有磁性或不具磁性的高分子聚合微球、二氧化硅微球。

在其中一个实施例中，所述溶剂为水或盐溶液。