[发明专利]一种胰岛移植微环境及其构建方法

权利要求书

1.一种胰岛移植微环境，其特征在于由医用有机硅材料和晶体构建三维支架；支架内种植间充质干细胞，支架外是生物胶形成保护膜。

2.根据权利要求1所述的一种胰岛移植微环境，其特征在于，所述有机硅材料是商品化的聚二甲基硅氧烷。

3.根据权利要求1所述的一种胰岛移植微环境，其特征在于，所述的晶体为NaCl晶体或其它可溶性晶体，颗粒大小为100~400 μm。

4.根据权利要求1所述的一种胰岛移植微环境，其特征在于，所述的聚二甲基硅氧烷与晶体比例为质量比1:10~4:1。

5.根据权利要求1所述的一种胰岛移植微环境，其特征在于，所述的间充质干细胞的来源为脐带、骨髓、脂肪、胎盘组织中的一种。

6.根据权利要求1所述的一种胰岛移植微环境，其特征在于，所述的生物胶保护膜是由自体血浆中的纤维蛋白与凝血酶形成的。

7.根据权利要求6所述的一种胰岛移植微环境，其特征在于，所述的凝血酶浓度为100~2000 IU/ml。

8.根据权利要求6所述的一种胰岛移植微环境，其特征在于，所述的自体血浆与凝血酶的比例为体积比10:1~1:1。

9.如权利要求1所述的一种胰岛移植微环境的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）取NaCl晶体，60℃烤箱干燥24~48小时；

（2）取商品化的聚二甲基硅氧烷与NaCl晶体按比例混合均匀；

（3）将步骤（2）得到的产物倒入模具中；

（4）正向压力1000 PSI压缩，固化4-12小时；

（5）将形成的支架从模具中取出，放入去离子蒸馏水中淘洗2天，将NaCl完全淘洗除去；

（6）将支架放入2M NaOH中50℃孵育24-48小时；

（7）将步骤（6）孵育后的支架用蒸馏水清洗三次；

（8）60℃烤箱干燥4小时，将支架烘干后，高压灭菌；

（9）用含有体积分数10%自体血清的PBS缓冲液浸泡支架过夜；

（10）将支架放入培养皿中，加入1~5×10⁶/ml的间充质干细胞的细胞悬液培养过夜；

（11）取出含间充质干细胞的支架，放入新的培养皿中；

（12）将分离的胰岛浓缩于50 μl~1000 μl的1640培养基中；

（13）将步骤（12）得到的胰岛滴加在步骤（11）获得的支架上，利用重力作用，装载入支架巨孔中；

（14）取自体血浆，加入凝血酶，混合均匀后，迅速滴加于支架外围，形成一层包绕支架的纤维蛋白胶，即制备得到含有间充质干细胞、胰岛细胞、胞外基质保护膜组成的移植胰岛微环境。

10.如权利要求1-9任一所述一种胰岛移植微环境在构建胰岛移植环境中的应用。