[发明专利]一种迭鞘石斛酸性多糖及其制备方法与应用在审
申请号: | 201811284970.3 | 申请日: | 2018-10-31 |
公开(公告)号: | CN109400740A | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 罗傲雪;范益军;张娇;宋曦;叶含薇;缪荣素 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61K31/715;A61P37/04 |
代理公司: | 成都天汇致远知识产权代理事务所(普通合伙) 51264 | 代理人: | 韩晓银 |
地址: | 611130 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 石斛 酸性多糖 醇沉 碱水 制备 应用 方法提取 免疫药物 免疫增强 脱脂 糖醛酸 小分子 干粉 烘干 构型 浸提 可用 蛋白 | ||
1.一种迭鞘石斛酸性多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、取迭鞘石斛粉末于圆底烧瓶中,加入石油醚后在水浴锅中微沸回流提取,过滤,弃滤液,烘干至恒重以去除脂溶性物质;药渣继续用乙醇微沸回流提取,过滤,弃滤液;干燥后的药渣再移入烧杯中加入氢氧化钠,室温下磁力搅拌浸提,收集滤液,重复提取一次,合并两次滤液后用盐酸调节至中性,弃沉淀后旋转蒸发至一定体积,加入Sevag试剂去蛋白,重复4次,收集合并上清液旋转蒸发;
步骤2、上清液于磁力搅拌器上搅拌,用分液漏斗向其中缓慢加入无水乙醇,离心弃沉淀;滤液中继续加无水乙醇,收集沉淀;依次用丙酮、乙酸乙酯、无水乙醇洗涤沉淀后离心,于4℃冰箱内保存备用;
步骤3、将上述样品用去离子水溶解后,装入透析袋中于烧杯中,在磁力搅拌的条件下用去离子水透析;收集透析后样品溶液冷冻干燥即得迭鞘石斛酸性多糖。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1中的石油醚的沸点为60-90℃,迭鞘石斛粉末与石油醚的质量体积比(g/ml)为1:4-3:4;回流提取时间为0.5h-1.5h;所述乙醇的体积百分含量为80%。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1中的氢氧化钠与迭鞘石斛粉末的摩尔质量比(mmol/g)为1:1-5:1;磁力搅拌浸提时间为4-8h。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1中的第一次旋转蒸发的物质与迭鞘石斛粉末体积质量比为3:2-7:2,Sevag试剂为体积比为1:4的正丁醇和三氯甲烷;Sevag试剂与与迭鞘石斛粉末体积质量比为3:2-7:2,第二次旋转蒸发的上清液与迭鞘石斛粉末的体积质量比(mL/g)为5:2-10:2。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2中的第一次无水乙醇的添加量为上清液与无水乙醇总体积的40%;第二次无水乙醇的添加量为滤液与无水乙醇总体积的60%。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤3中的透析时间为64h-80h,8h换一次水。
7.权利要求1-6任一权利要求所述的制备方法制备得到的迭鞘石斛酸性多糖。
8.根据权利要求7所述的迭鞘石斛酸性多糖,其特征在于,为α-构型,分子量为Mw=5.78×104 Da,其中糖醛酸含量为292.2 mg/g。
9.权利要求7所述的迭鞘石斛酸性多糖在制备提高免疫药物中应用。
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