[发明专利]用作诱发抗原特异性T细胞反应的免疫原性增强剂的融合蛋白

说明书

本申请公开一种用作增强抗原特异性T细胞反应的免疫原增强剂的融合蛋白。所述融合蛋白包含：(a)抗原呈递细胞(APC)结合域或CD91受体结合域；(b)蛋白转导域；及(c)病原体的抗原，其中，所述APC结合域或CD91受体结合域位于所述融合蛋白的N端，且所述病原体的抗原位于所述蛋白转导域的C端。所述蛋白转导域选自：(i)融合多肽，其包含T细胞致敏信号转导肽、连接子及转位肽；(it)T细胞致敏信号转导肽；及(iii)长度为34‑112个氨基酸残基的转位肽。

本申请为“用作诱发抗原特异性T细胞反应的免疫原性增强剂的融合蛋白”发明专利申请的分案申请，母案为进入国家阶段的PCT国际申请，其中，母案的国家申请号为“201380063896.1”，PCT国际申请日为2013年12月03日，PCT国际申请号为PCT/US2013/072753。

技术领域

本发明主要涉及融合蛋白，并且更具体地涉及增强T细胞介导的免疫反应的融合蛋白。

背景技术

分子生物学已使亚单位疫苗的生产成为可能，其中，免疫原为母蛋白或母复合物的片段或亚单位。所需要的是可诱发T细胞致敏反应又能足够灵活的并入来自许多感染源的毒株的序列的稳定疫苗的开发。

发明内容

一方面，本发明涉及一种融合蛋白，其包含：

(a)抗原呈递细胞(APC)结合域或CD91受体结合域，其位于所述融合蛋白的N端；

(b)蛋白转导域，其位于所述APC结合域或CD91受体结合域的C端，所述蛋白转导域选自：

(i)融合多肽，其包含T细胞致敏信号转导肽、连接子及转位肽，其中：

(1)所述T细胞致敏信号转导肽位于所述融合多肽的N端；

(2)所述连接子包含SEQ ID NO:15，其连接所述T细胞致敏信号转导胜肽与所述转位肽；且

(3)所述转位肽的长度为34-112个氨基酸残基，且包含与SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:20或SEQ ID NO:4至少90％相同的氨基酸序列；

(ii)T细胞致敏信号转导肽；及

(iii)长度为34-112个氨基酸残基的转位肽，其包含与SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:20或SEQ ID NO:4至少90％相同的氨基酸序列；及

(c)病原体的抗原，其位于所述蛋白转导域的C端；

其中：

所述T细胞致敏信号转导肽的长度为28-53个氨基酸残基，且包含与SEQ ID NO:31至少90％相同的氨基酸序列，其中Xaa⁸为I或L；Xaa¹⁰为V、F或A；Xaa¹¹为M或L；Xaa¹⁷为L或I；且

若所述蛋白转导域为所述转位肽(biii)，则所述APC结合域或CD91受体结合域无假单胞菌外毒素A(PE)结合域I的氨基酸序列。

在本发明的一个实施方式中，所述APC结合域或所述CD91受体结合域为包含与选自SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7及SEQ ID NO:8的序列至少90％相同的氨基酸序列的多肽。或者，所述APC结合域选自受体相关蛋白-1(RAP1)区域III、α-2-巨球蛋白受体相关蛋白(A2M)、HIV-Tat、热休克蛋白(HSP)及假单胞菌外毒素A(PE)结合域I。

在本发明的另一个实施方式中，所述融合蛋白无假单胞菌外毒素A(PE)结合域I的氨基酸序列。

在本发明的另一个实施方式中，所述融合蛋白进一步包含位于所述融合蛋白C端的内质网(ER)滞留序列。