[发明专利]变体硫酯酶及使用方法

权利要求书

1.一种编码变体酰基-ACP硫酯酶的核酸分子，该核酸分子包括C-末端催化结构域和N-末端疏水结构域以及特异性结构域，其中该疏水结构域和/或该特异性结构域中的一个或多个与该催化结构域是异源的。

2.如权利要求1所述的核酸，其中该核酸编码一种变体酰基-酰基载体蛋白(ACP)硫酯酶(TE)，该变体酰基-酰基载体蛋白(ACP)硫酯酶(TE)包括：

i)来自一种C10:0酰基-ACP偏好型TE的特异性结构域和来自一种C12:0酰基-ACP偏好型TE的催化结构域；

ii)来自一种C12:0酰基-ACP偏好型TE的特异性结构域和来自一种C14:0酰基-ACP偏好型TE的催化结构域；

iii)来自一种C14:0酰基-ACP偏好型TE的特异性结构域和来自一种C12:0酰基-ACP偏好型TE的催化结构域；

iv)来自一种C12:0酰基-ACP偏好型TE的特异性结构域和来自一种C10:0酰基-ACP偏好型TE的催化结构域；或

v)来自一种C10:0酰基-ACP偏好型TE的特异性结构域和来自一种C8:0酰基-ACP偏好型TE的催化结构域。

3.如权利要求1至2中任一项所述的核酸，其中该核酸编码一种特异性结构域，该特异性结构域包括：

a)一种酰基-ACP-TE的对应于选自下组的氨基酸序列的氨基酸残基，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:43的氨基酸残基125-163；SEQ ID NO:44的氨基酸残基125-163；SEQ IDNO:45的氨基酸残基152-190；SEQ ID NO:46的氨基酸残基139-177；SEQ ID NO:47的氨基酸残基117-155；SEQ ID NO:60的氨基酸残基158-196；以及SEQ ID NO:61的氨基酸残基156-194；

b)一种基序，该基序包括氨基酸序列SI(V/L/E)(A/T)(V/L)MN(H/Y/M/I)(L/M/V/F)QE(T/A)(A/S/T)(L/I)N(H/Q)(A/V/C)(K/E/R)(S/I/T/N/C)(V/L/A/T/I/N)G(L/I)(L/S/M)(G/L/D/N/E)(D/N/E)G(F/L)G(T/E/R/S/A)(T/S)(L/P/R)(E/G)M(S/Y/F/C/T)(K/R/L)(R/K/N/M)(D/G/N)L(M/I/F)和/或

c)与选自下组的氨基酸序列至少60％的序列一致性，该组由以下各项组成：SEQ IDNO:43的氨基酸残基125-163；SEQ ID NO:44的氨基酸残基125-163；SEQ ID NO:45的氨基酸残基152-190；SEQ ID NO:46的氨基酸残基139-177；SEQ ID NO:47的氨基酸残基117-155；SEQ ID NO:60的氨基酸残基158-196；以及SEQ ID NO:61的氨基酸残基156-194。

4.如权利要求1至3中任一项所述的核酸，其中该核酸编码一种特异性结构域，该特异性结构域促进具有改变的脂肪酸谱的甘油三酯的生产并且包括：

a)一种基序，该基序包括氨基酸序列SI(V/L/E)(A/T)(V/L)MN(H/Y/M/I)(L/M/V/F)QE(T/A)(A/S/T)(L/I)N(H/Q)(A/V/C)(K/E/R)(S/I/T/N/C)TGI(L/S/M)L(D/N/E)G(F/L)G(T/E/R/S/A)(T/S)L(E/G)M(S/Y/F/C/T)K(R/K/N/M)(D/G/N)L(M/I/F)WV(V/L)I(K/R)(M/T)(Q/H)(I/V)K；和/或

b)与SEQ ID NO:61的氨基酸残基156-203至少60％的序列一致性，其中在位置166处的氨基酸残基是谷氨酰胺；在位置175处的氨基酸残基是苏氨酸；在位置177处的氨基酸残基是异亮氨酸；在位置179处的氨基酸残基是亮氨酸；在位置186处的氨基酸残基是亮氨酸；在位置190处的氨基酸残基是赖氨酸；在位置198处的氨基酸是异亮氨酸并且在位置203处的氨基酸是赖氨酸；和/或

c)SEQ ID NO:61。