[发明专利]靶向Hsp27抑制肠道病毒A71型感染的方法及相关应用

说明书

本发明提供了靶向Hsp27抑制肠道病毒A71型感染的方法及相关应用。具体地，本发明提供了Hsp27作为靶点在开发、筛选和/或制备用于防治和/或抑制病毒感染的药物中的应用；其中，所述的病毒为含有IRES序列的正链RNA病毒，例如EV‑A71、HCV或登革热病毒。本发明还提供了靶向小热休克蛋白Hsp27抑制肠道病毒A71感染的方法。

技术领域

本发明是关于小热休克蛋白Hsp27的新应用，具体地说，本发明是关于靶向Hsp27抑制肠道病毒A71型(EV-A71)感染的方法及相关应用。

背景技术

手足口病(HFMD)是全球关注的问题，主要由肠道病毒A71型(EV-A71)和柯萨奇病毒A16(CVA16)引起。手足口病通常是一种自限性疾病，临床表现较轻，但在某些情况下，它还会导致严重的神经系统并发症，甚至导致儿童尤其是5岁以下儿童死亡。并发症包括脊髓灰质炎样急性弛缓性麻痹(poliomyelitis-like acute flaccid paralysis)、无菌性脑膜炎、脑干脑炎和肺水肿。

EV-A71于1969年首次在加利福尼亚州分离得到，1973年被确定是引起日本手足口病的病原体。近几十年来，有EV-A71感染零星出现或爆发流行病的报道，特别是在亚太地区。虽然已经做了很多工作来开发治疗EV-A71感染的药物，确定了几种潜在的抗病毒药物，包括芦平曲韦(AG7088)、DTriP-22、山奈酚、NITD008、楝酰胺(Roc-A)、Oblongifolin M和Ver-155008；遗憾的是，没有有效的抗EV-A71感染的预防或治疗剂。

EV-A71是一种无包膜的正链RNA病毒，属于小核糖核酸病毒科、肠道病毒属。EV-A71RNA基因组的长度约为7.4kb，包括一个侧翼为两个非翻译区(5'-UTR和3'-UTR)的开放阅读框(ORF)。EV71 5'非翻译区(5'-UTR)含有I型内部核糖体进入位点(IRES)。初次感染后，EV-A71与宿主受体(SCARB2、PSGL1)结合并将其病毒RNA释放到细胞质中。一旦病毒RNA基因组释放到宿主细胞中，将通过IRES介导的翻译合成单个多聚蛋白。该多聚蛋白被病毒蛋白酶2A^pro和3C^pro酶解切割成各种结构和非结构病毒蛋白(VP1-VP4、2A-2C、3A-3D)。由于具有有限编码能力的小RNA基因组，EV-A71利用宿主因子来支持病毒蛋白翻译和基因组复制。这些因子，也称为IRES反式作用因子(ITAF)，是IRES依赖性翻译所必需的。ITAF可以帮助招募核糖体并与一些典型的翻译起始因子合作启动翻译。在过去几年中已经鉴定了许多ITAF，例如，FBP1、FBP2、hnRNP A1、hnRNP K、AUF1/hnRNP D、Sam68、HuR和Ago2(Lee,K.M.,Chen,C.J.and Shih,S.R.(2017)Regulation Mechanisms of Viral IRES-DrivenTranslation.Trends in microbiology,25,546-561)。小核糖核酸病毒能够切割宿主蛋白以促进其复制。2A^pro和3C^pro切割真核启动因子4G(eIF4G)和聚A结合蛋白(PABP)，这些因子对于帽依赖性翻译是必需的。这些切割导致宿主mRNA翻译的关闭，但有利于病毒蛋白质合成(Kempf,B.J.and Barton,D.J.(2008)Poliovirus 2A(Pro)increases viral mRNA andpolysome stability coordinately in time with cleavage of eIF4G.Journal ofvirology,82,5847-5859；Joachims,M.,Van Breugel,P.C.and Lloyd,R.E.(1999)Cleavage of poly(A)-binding protein by enterovirus proteases concurrent withinhibition of translation in vitro.Journal of virology,73,718-727；Borman,A.M.,Kirchweger,R.,Ziegler,E.,Rhoads,R.E.,Skern,T.and Kean,K.M.(1997)elF4Gand its proteolytic cleavage products:effect on initiation of proteinsynthesis from capped,uncapped,and IRES-containing mRNAs.RNA(New York,N.Y.),3,186-196)。2A^pro还切割FBP1，并且切割产物FBP11-371与全长FBP1配合以正向调节IRES依赖性翻译(Hung,C.T.,Kung,Y.A.,Li,M.L.,Brewer,G.,Lee,K.M.,Liu,S.T.and Shih,S.R.(2016)Additive Promotion of Viral Internal Ribosome Entry Site-MediatedTranslation by Far Upstream Element-Binding Protein 1and an Enterovirus 71-Induced Cleavage Product.PLoS pathogens,12,e1005959)。NLRP3炎性体保护小鼠免受EV-A71感染，然而，它被2A^pro和3C^pro切割以促进病毒感染(Wang,H.,Lei,X.,Xiao,X.,Yang,C.,Lu,W.,Huang,Z.,Leng,Q.,Jin,Q.,He,B.,Meng,G.et al.(2015)ReciprocalRegulation between Enterovirus 71and the NLRP3Inflammasome.Cell reports,12,42-48)。宿主-病毒相互作用的潜在机制非常复杂。