[发明专利]一种植物干细胞活性成分及其制备方法

说明书

本发明涉及一种植物干细胞活性成分的制备方法，将处于旺盛生长状态的植物干细胞在‑20～‑10℃的条件下，在20～30min内完成冻结，维持冻结状态1～5h，然后在26～30℃的条件下进行解冻，所得液体即为所述植物干细胞活性成分。本发明的方法制备得到的提取物可改善皮肤的代谢机制，不需渗入皮肤内部即可对皮肤起到调整的作用，安全性高，其在抗衰老和抗脱发方面表现出显著的效果，具有广泛的应用前景。而且本发明的培养方法可控性高，可以保证产品的批次稳定性。

技术领域

本发明涉及天然产物的提取利用技术领域，具体涉及一种植物干细胞活性成分及其制备方法。

背景技术

植物细胞中含有多种对人体有益的功效成分，从植物中提取有效成分进行应用历史悠久，如我国传统的中药学。随着科学技术的发展，从植物中提取有效成分进行应用，不论是从提取方法还是应用的领域，均有了长足的发展。从提取方法来看，从传统的水提法，发展到有机溶剂提取法，微波提取法，超声波提取和超临界提取等技术手段，其应用也从传统的疾病治疗拓展到食品、化妆品等各种领域。

但是，以植物植株为对象提取有效成分的过程中存在各种问题。一方面，植物在分化和长期生长的过程中，由于受到各种的外界刺激，会产生应激反应，在应激反应的过程中会产生毒有害物质，这些有害物质对于植物中有效成分发挥相关的功效具有一定的负面影响。另一方面，植物的生长受环境、温度等各种因素的影响，由于其生长环境的不稳定，植物中有效成分的种类和含量也会存在一定的差异，这也会影响其后续的应用。而且，现有技术通常采用有机溶剂对植物中的某一种或某几种有效成分进行提取，这也会对有效成分综合功效的发挥起到一定的限制作用。

植物干细胞是一种尚未分化发育的细胞，具有无限自我更新复制的能力，能分化成特定组织，从而形成植物的茎、叶等重要的器官。正是由于它的这种强大的分化能力，它被广泛地应用到化妆品、药品等技术领域。而且由于植物干细胞通常在光生物反应器中进行培养，与分化发育成正常的植株相比，培养环境稳定，细胞中积累的毒素较少，在应用过程中具有良好的效果。

发明内容

本发明的目的是提供一种植物干细胞活性成分的制备方法，其步骤为，将处于旺盛生长状态的植物干细胞在-20～-10℃的条件下，20～30min内完成冻结，维持1～5h，然后在26～30℃的条件下进行解冻，所得液体即为所述植物干细胞活性成分。

植物干细胞中含有各种活性成分，尤其是处于旺盛生长状态的干细胞中活性成分的含量尤为丰富，培养结束后，在20～30min将其迅速地冷冻破壁，在这个时间段内，细胞来不及产生有毒的代谢副产物，即破壁在干细胞在最佳的生长状态下进行，可最大限度地保护植物干细胞中的活性成分，而且，在-20～-10℃的条件下在20～30min内完成冻结，并维持冻结状态1～5h，可使促使冰晶的形成和长大，有利于细胞的充分破壁，进一步的，在温度26～30℃的条件下进行解冻，既可进一步促进有效成分的溶出，还不会导致细胞中有效成分的破坏。

优选的，所述植物干细胞为草莓、苹果或豌豆的干细胞。在本发明所述的制备方法下，上述植物的干细胞更容易被充分破碎，所得的干细胞的活性更高。

更优选的，所述干细胞为苹果干细胞由苹果新生枝条诱导得到。其制备方法详见中国专利CN104711215A。

优选的，冷冻破壁重复数次进行，至破壁充分。对于一些不易破碎的干细胞，通过数次破壁可使破碎更充分。

优选的，所述植物干细胞在液体培养基中悬浮培养至旺盛的生长状态。在上述的培养状态下，植物干细胞生长状态良好且可进行大量的繁殖。

优选的，将所述植物干细胞置于气升光生物反应器中，在温度15～25℃的条件下进行培养；

进一步优选的，在温度17～18℃的条件下进行培养。上述的温度为植物干细胞生长的最适温度，在上述温度条件下，干细胞可产生大量有益的代谢产物。