[发明专利]一种增加鱼肉肌球蛋白疏水性的方法有效
申请号: | 201811298275.2 | 申请日: | 2018-11-02 |
公开(公告)号: | CN109336962B | 公开(公告)日: | 2022-10-14 |
发明(设计)人: | 洪鹏志;刘唤明;付苇娅;周春霞;李承勇;千忠吉;杨萍;朱东宏 | 申请(专利权)人: | 广东海洋大学 |
主分类号: | C07K14/46 | 分类号: | C07K14/46;C07K1/14 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 524000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 增加 鱼肉 肌球蛋白 疏水 方法 | ||
1.一种增加鱼肉肌球蛋白疏水性的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.将鲜鱼宰杀,取其白肉部分,提取肌球蛋白,获取肌球蛋白原液;
S2.将肌球蛋白原液装入透析袋,放入在pH7.0-10.0的处理液中进行透析,所述处理液包括150-400mmol/L的盐溶液、5-25mmol/L的氨基酸溶液,透析1-3h;
S3.向处理液中加入介导液,并使其终浓度在160-380mmol/L;
S4.采用梯度升温的方式将处理液加热至40-60℃,继续透析7-12h;
S5.将透析后的肌球蛋白原液倒出,自然冷却至室温;
所述介导液包括以下重量份数的组分:茶多酚23-35、没食子酸9-17、柠檬酸钠4-10;
所述氨基酸溶液包括以下重量份数的组分:赖氨酸5-18、组氨酸6-14、甘氨酸3-10、精氨酸8-19、甘油3-7。
2.根据权利要求1所述的增加鱼肉肌球蛋白疏水性的方法,其特征在于,所述梯度升温将处理液加热至40℃,具体步骤为:0-20min加热至25℃、0-30min加热至35℃、2-5min加热至40℃。
3.根据权利要求1所述的增加鱼肉肌球蛋白疏水性的方法,其特征在于,所述梯度升温将处理液加热至50℃,具体步骤为:0-20min加热至25℃、0-30min加热至37℃、3-10min加热至43℃、3-7min加热至50℃。
4.根据权利要求1所述的增加鱼肉肌球蛋白疏水性的方法,其特征在于,所述梯度升温将处理液加热至55℃,具体步骤为:0-20min加热至25℃、0-30min加热至37℃、3-10min加热至43℃、3-7min加热至50℃、3-7min加热至55℃。
5.根据权利要求1所述的增加鱼肉肌球蛋白疏水性的方法,其特征在于,所述梯度升温将处理液加热至60℃,具体步骤为:0-20min加热至25℃、0-30min加热至37℃、3-10min加热至43℃、3-7min加热至50℃、3-10min加热至60℃。
6.根据权利要求1所述的增加鱼肉肌球蛋白疏水性的方法,其特征在于,所述盐溶液为KCl或NaCl中的任一种。
7.根据权利要求1所述的增加鱼肉肌球蛋白疏水性的方法,其特征在于,所述肌球蛋白的提取方法为:取新鲜搅碎的鱼肉,加5倍鱼肉重量的溶液A在20000r/min高速匀浆30s,静置15min后离心取沉淀,重复上述过程3次;向所得沉淀中加入3倍重量的溶液B,搅拌均匀后离心;纱布过滤,取滤液用冰蒸馏水稀释,静置后离心得沉淀,向沉淀中加入1/5倍溶液C,混匀后放置2h,混合体系中添加1/10倍溶液D,搅拌1h;加入饱和硫酸铵至饱和度40%时离心取上清液,继续加饱和硫酸铵至饱和度45%时离心取沉淀;沉淀于透析液E中透析至无SO42-检出,然后离心分离,所得上清液即为肌球蛋白溶液;
所述溶液A包括20mmol/L PBS、2mmol/L PMSF、0.02%叠氮钠,溶液pH为6.9;所述溶液B包括0.35mol/L KCl、5mmol/L ATP、7mmol/L MgCl2、0.3mmol/L DTT,溶液pH6.2;所述溶液C包括0.12mol/L Tris-maleic acid、1.6mol/L KCl、0.6mmol/L DTT,溶液pH为7.4;所述溶液D包括0.13mol/L ATP、48mmol/L MgCl2、5.5mmol/L EGTA、pH7.5;所述透析液E包括18mmol/L PBS、1mol/L NaCl,溶液pH6.8。
8.根据权利要求1所述的增加鱼肉肌球蛋白疏水性的方法,其特征在于,所述步骤S4还包括,在透析结束后,将处理后的蛋白质溶液放入超临界流体中,进行超临界流体处理5-15min。
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