[发明专利]一种用于活化干细胞的方法和装置

说明书

本发明属于生物技术领域，公开了一种用于活化干细胞的方法和装置，取健康BALB/cl和C57BL/6小鼠，雌雄不限，6～8周龄；小鼠脾脏干细胞的培养和分化：小鼠脾脏干细胞的培养条件；培养皿用gelatin 0.1％包被,加小鼠脾脏成纤维细胞为滋养层,克隆形成能力和胚样小体形成能力检测；Sp‑MSCs的分离培养；分化能力鉴定；小鼠T淋巴细胞分离；细胞因子处理,抗体阵列以及Westernblot；淋巴细胞转化实验和混合淋巴细胞反应：统计学。本发明提出了通过分析细胞信号传导网络来表征细胞状态的一个新概念。通过同时检测细胞内的多个信号网络节点,就能够揭示细胞内各种激酶的活力动态。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种用于活化干细胞的方法和装置。

背景技术

目前，业内常用的现有技术是这样的：

细胞治疗在临床上被寄予极大希望。为得到大量所需的细胞类型,从脾脏干细胞分化就成为最可能的选择之一。这里很重要的一个问题就是质量控制,因为不同的发明室的培养条件及对细胞的处理方法有差别。不同发明组的起始及终端细胞间有多相似？这个细胞确认问题在体外分化发明中尤其重要,因为这时细胞以不均一的混合形式,经历一系列的发育过程,并多次改变其分化状态。尽管一些分子标记的表达可以用来表征分化状态,但是绝大部分的分子标记在发育过程中其特异性都是相对的。细胞分化命运的确定,是发育生物学中的一个关键问题,其中包括复杂的组织相互作用和多个信号传导途径的整合。细胞通常都有一个分化系的历史,然后逐渐成为进一步分化的细胞类型。在另一方面,细胞的分化状态又常常被认为是由转录因子的特异组合而确定。这一观念被最近iPSC的成功诱导而得到强化:通过转入少数几个因子,成体动物的成纤维细胞和其他终端分化细胞都可以被重编程为类似于脾脏干细胞的iPSC。然而,这个观点可能过于简化了,因为其中关于细胞分化的历史以及相关的信号传导事件都被忽略了。

间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)是一种最早在骨髓中发现的非造血谱系的干细胞，随后亦在骨、脐带和脂肪等组织中有发现。MSCs不仅具有干细胞的共性，同时也具有自身的特性。MSCs像大多数干细胞一样，具有多向分化和自我更新能力。更重要的是，MSCs是目前已知的多种干细胞中，较为确定地具有免疫调节能力的一类干细胞。相关研究表明，MSCs可以调节多种免疫细胞如巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、树突状细胞和中性粒细胞等发育分化和凋亡，有助于维持机体免疫反应和免疫稳态。此外，MSCs还调节多种免疫细胞的功能，避免过度的机体免疫应答。目前的研究结果表明，MSCs主要通过表达细胞间粘附分子(如细胞间粘附分子1和内皮细胞粘附分子1)、释放一些重要的细胞因子和活性物质以及释放膜微粒等形式来发挥免疫调控作用。

脾脏是人和动物体内最大的外周免疫器官。脾脏内含有多种免疫细胞如巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、树突状细胞和中性粒细胞等，

是免疫细胞发育和成熟的重要器官之一，更是机体的体液免疫中心和细胞免疫。脾脏内免疫细胞的发育功能要受到脾脏微环境的调控。多种基质细胞混合组成的脾脏基质组织既为免疫细胞发育提供了空间依托，又表达多种活性分子调节免疫细胞功能，是脾脏微环境的重要组成部分。因此，脾脏基质组织内细胞对于免疫细胞发育和功能的调控一直是免疫学研究的热点之一。但是，以往的研究多关注于脾脏内皮源性基质细胞和成纤维细胞等成体细胞的作用，对于处于发育源头的脾脏间充质干细胞(spleenmesenchymalstemcells，Sp-MSCs)是否参与免疫调控，国内外文献报道不多。

综上所述，现有技术存在的问题是：

揭示细胞内各元件组织方式的一个方法是,通过外加刺激来探讨细胞的反应方式。细胞信号传导网络对刺激因子的特征性反应已经被应用于探讨肿瘤细胞状态的不均一性。进一步发明表明,细胞对外加刺激的处理方式是通用的,而表现型的差别主要在于上游信号网络的激活方式有不同。因此,细胞的特征有可能通过分析其信号传导网络来揭示。