[发明专利]一种青稞试管苗快繁方法

说明书

本发明提供了一种青稞试管苗快繁的方法，它是以青稞种子为外植体，通过愈伤诱导、愈伤继代和愈伤分化得到试管苗的方法。本发明还提供了前述方法所用到的培养基的配方。本发明可以有效的实现青稞快繁，青稞试管苗培育方面具有较好的应用前景。

技术领域

本发明涉及植物组培领域，特别涉及一种青稞的试管苗快繁方法。

背景技术

青稞是我国西部特有的禾本科植物。青稞在青藏高原上种植约有3500年的历史，从物质文化之中延伸到精神文化领域，在青藏高原上形成了内涵丰富、极富民族特色的青稞文化。青稞具有重要的药用价值及营养价值，青稞是西藏四宝之首糌粑的主要原料。因其地理位置和环境气候的特殊性，青稞一直是藏族人民的主要的粮食作物。

青稞的育种目标主要集中在产量，对生物和非生物胁迫的抗性等方面。然而传统的遗传育种方法存在一定的局限性。20世纪末兴起的植物基因工程为植物特性的遗传改良提供了新途径。植物转基因技术可以充分利用外源基因，在相对稳定的维持植物品种其他的各种性状基础上，可以定向改良其所调控的特性，这为青稞新品种的培育开阔了一个崭新的途径。

高效而稳定的植株再生体系是植物遗传转化获得成功的重要前提条件。植物的体细胞胚发生是植物的体细胞在离体条件下，通过与合子胚类似的发育途径得到新个体的过程。体细胞胚发生途径再生体系的建立有助于青稞的试管苗快繁，人工种子的生产和冷藏保存，同时胚性细胞是进行青稞遗传转化的最佳受体，可以以体细胞胚为受体进行青稞遗传转化的研究。

目前关于青稞的试管苗快繁研究主要集中在激素组合的优化上面，但未见对外植体的基因型(品种)、基本培养基等进行优化的报道；基于此，现有技术中最佳激素组合可能仅仅适用于常见品种和常见基本培养基的情形，所提供的方法有待优化。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种快繁培养基，它包括诱导培养基、继代培养基和分化培养基；

本发明提供了一种快繁培养基，它包括诱导培养基、继代培养基和分化培养基；

所述诱导培养基是在MS培养基的基础上，还含有1g/L(NH4)2SO4、1.25mg/LCUSO4、0.5g/L谷氨酰胺、0.5g/L脯胺酸、0.8g/L水解酪蛋白、30g/L蔗糖、10g甘露醇、1.5mg/L毒莠定、1.5mg/L 2,4-D、0.2mg/L KT和3.5g/L植物凝胶的培养基；

所述继代培养基是在MS培养基的基础上，还含有MS培养基中加入1g/L(NH4)2SO4、1.25mg/L CUSO4、0.5g/L谷氨酰胺、0.5g/L脯胺酸、0.8g/L水解酪蛋白、30g/L蔗糖、10g甘露醇、3.5g/L植物凝胶、4mg/L毒莠定和0.1mg/L 6-BA的培养基；

所述分化培养基是在MS培养基的基础上，还含有1mg/L 6-BA和1mg/L KT的培养基。

本发明还提供了如前所述快繁培养基在青稞试管苗快繁中的用途。

本发明还提供了一种青稞试管苗快繁方法，它是使用前述快繁培养基，按如下步骤操作：

(1)青稞种子置于诱导培养基上培养出愈伤组织；

(2)将愈伤组织接种于继代培养基培养，诱导出胚性愈伤；

(3)将胚性愈伤接种于分化培养基，诱导出芽。

进一步地，步骤(1)所述青稞的品种是ZYM0439或昆仑14号。

进一步地，步骤(1)所述青稞的品种是ZYM0439。

进一步地，步骤(1)的种子是带胚乳的碎胚。

本发明的方法，可以将种子分成多个碎片作为外植体，并维持较好的愈伤诱导率，增加了快繁的产量。