[发明专利]基于可循环使用SERS传感器的酪氨酸酶活性检测方法

说明书

本发明提供一种基于可循环使用SERS传感器的酪氨酸酶活性检测方法。其包括如下步骤：(a)提供表面增强拉曼散射(SERS)传感器，该传感器为一自组装电极，该电极上具有SERS活性的纳米金颗粒膜层，在纳米金颗粒膜层上具有拉曼信号分子；(b)建立酪氨酸酶活性检测指纹图谱及标准曲线；(c)获取所述SERS传感器与样品溶液中的酪氨酸酶反应后的表面增强拉曼光谱；(d)将步骤(c)获得的样品溶液的表面增强拉曼光谱与所述指纹图谱进行比较，并进行定性定量分析。(e)将检测后的传感器利用电化学调控实现可循环利用。本发明优点是，克服现有检测方法的技术不足，快速、灵敏地检测酪氨酸酶的活性并且传感器可循环使用有望实现对酪氨酸酶的自动化检测。

技术领域

本发明涉及生物化学分析领域，具体地说，是一种基于表面增强拉曼散射(SERS)效应的可循环使用SERS传感器用于酪氨酸酶活性检测的方法。

背景技术

酪氨酸酶作为一种重要的氧化还原酶，在人体内黑色素的合成过程中起着至关重要的作用。在人体中，非正常水平的酪氨酸酶将引发白癜风，雀斑和帕金森氏综合征等疾病，并且酪氨酸酶是黑色素瘤的标志物之一。因此，开发有效的检测酪氨酸酶活性的方法将显著提升酪氨酸酶相关疾病的早期诊断水平并促进深入了解酪氨酸酶的生理功能。

目前用于检测酪氨酸酶的方法主要有：比色法、电化学法、高效液相色谱法和荧光法等，然而，这些方法或灵敏度不佳难以胜任低浓度样品检测，或仪器昂贵，成本较高，或容易受到污染需要频繁校准。相比之下，荧光法的灵敏度和空间分辨率较高，但检测常常受到生物样品自身荧光背景干扰以及光漂白、光毒性的影响。

表面增强拉曼散射(SERS，Surface-enhanced Raman Scattering)是一种能够提供物质结构及化学组成信息的分析技术，它具有高灵敏度、高选择性、快速响应、抗光漂白、抗光毒性等优异的分析性能。这些综合优势使表面增强拉曼光谱成为广泛应用于生物分析的检测策略，例如蛋白鉴定、DNA检测和细胞分析等。但由于蛋白分子较为复杂，表面增强拉曼光谱谱图的解析较为困难，致使其直接检测选择性受到限制。另外，生命体中的酪氨酸酶因其分子较为复杂难以直接获取特征表面增强拉曼光谱信号，因此相关的表面增强拉曼光谱检测研究较为少见。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种基于可循环使用SERS传感器的酪氨酸酶活性检测方法，其能够充分发挥表面增强拉曼光谱的技术优势、克服现有检测方法的技术不足，快速、灵敏和具有选择性地检测血清中酪氨酸酶的活性。