[发明专利]用于使血液样品成像的方法、试剂盒及系统

权利要求书

1.一种用于使血液样品成像的方法，所述方法包括：

将包括红细胞的细胞悬浮液经由通过载体限定的入口引入到所述载体，所述载体是具有基底表面的封闭腔体，所述载体具有大于或等于当所述细胞悬浮液在所述基底表面上时的垂直高度h的垂直高度H，所述细胞悬浮液包括由以下函数确定的细胞浓度C：

C＝F/(h*pi/4*d²)；

F是预期的基底表面覆盖度；d是所述细胞悬浮液中的细胞的平均细胞尺寸；pi是定义圆周长与它的直径的比率的常数；并且h和d的单位是mm；

使所述细胞悬浮液中的细胞沉降在所述载体的所述基底表面上以在所述载体的所述基底表面上形成细胞单层；以及

获取所述细胞单层的至少一部分的至少一幅显微图像，

其中，通过设置为不超过当所述细胞悬浮液在所述基底表面上时的垂直高度的20％的景深(DOF)的显微镜获得所述至少一幅显微图像。

2.如权利要求1所述的方法，其中使所述细胞悬浮液中的细胞沉降在所述载体的所述基底表面上以在所述载体的所述基底表面上形成所述细胞单层包括允许用于所述细胞沉降在所述基底表面上作为单层的时间段少于5分钟。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述载体的垂直高度在20μm至300μm之间。

4.如权利要求1所述的方法，其中获取所述至少一幅显微图像包括获取多幅显微图像，所述多幅显微图像的至少两幅在不同的条件下提供，所述不同的条件从包括如下项的组中选择：使所述基底表面的不同部分成像、以及使用不同的照射条件。

5.如权利要求1所述的方法，其中，所述细胞悬浮液具有如下的浓度：当使所述细胞悬浮液中的几乎所有细胞沉降在所述载体的所述基底表面上以形成所述细胞单层时，在表面上形成单层而在细胞之间几乎没有重叠。

6.如权利要求1所述的方法，还包括在所述引入之前，以稀释因子稀释包括红细胞的血液样品以获得所述细胞悬浮液。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述稀释因子在50与300之间。

8.如权利要求1所述的方法，还包括通过稀释包括红细胞的血液样品生成所述细胞悬浮液以获得如下的细胞浓度：使得在所述细胞悬浮液中的细胞沉降在所述基底表面上后，所述细胞的密度在10,000至30,000个细胞/mm²之间。

9.如权利要求8所述的方法，其中形成所述细胞悬浮液包括形成如下细胞悬浮液：使得在所述细胞悬浮液中的细胞沉降在所述基底表面后，所述细胞形成具有在40％与90％之间的平均基底表面覆盖度的单层。

10.如权利要求1所述的方法，还包括分析所述至少一幅显微图像以基于所述至少一幅显微图像确定所述细胞悬浮液中病原体的存在或不存在。

11.如权利要求10所述的方法，其中分析所述至少一幅显微图像以基于所述至少一幅显微图像确定所述细胞悬浮液中病原体的存在或不存在包括：分析所述至少一幅显微图像以基于所述至少一幅显微图像确定所述细胞悬浮液中血液感染原生动物的存在或不存在。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述血液感染原生动物选自由锥虫属、疟原虫属、弓形虫属和巴贝虫属组成的属，并且其中，分析所述至少一幅显微图像以基于所述至少一幅显微图像确定所述细胞悬浮液中病原体的存在或不存在包括：分析所述至少一幅显微图像以基于所述至少一幅显微图像确定所述细胞悬浮液中来自所选择的属中的血液感染原生动物的存在或不存在。

13.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞悬浮液在所述基底表面上时的垂直高度在20μm与1000μm之间。