[发明专利]基因和化学药物共转运载体及其使用方法有效
申请号: | 201811307307.0 | 申请日: | 2018-11-05 |
公开(公告)号: | CN109364264B | 公开(公告)日: | 2021-12-10 |
发明(设计)人: | 曹美文;赵文婧;卢沙;王瑜;王生杰;夏永清 | 申请(专利权)人: | 中国石油大学(华东) |
主分类号: | A61K47/64 | 分类号: | A61K47/64;A61K9/08;A61K31/704;A61K31/713;A61K31/538;A61K45/06 |
代理公司: | 青岛清泰联信知识产权代理有限公司 37256 | 代理人: | 李祺;张洁 |
地址: | 266580 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因 化学 药物 转运 载体 及其 使用方法 | ||
1.多肽/药物/基因分子负载体,其特征在于,将多肽分子溶于缓冲液中自组装为纳米纤维状结构,先与疏水性药物分子或模拟药物分子溶液充分结合,得到多肽/药物分子负载体溶液,再将所述多肽/药物分子负载体溶液与基因分子溶液在预定条件下充分混合制备得到,即多肽/药物/基因分子负载体溶液;
其中,所述预定条件为:溶液中基因分子浓度为1-50μg/mL,多肽分子正电荷与基因分子负电荷数目的比例为5.0-50.0;
所述将多肽分子溶于缓冲液中自组装为纳米纤维状结构的步骤包括:
配制浓度为2.0-10.0 mM的多肽分子溶液,溶于pH为7.2-7.4的缓冲溶液中,放置3天以上,自组装为纳米纤维状结构;
其中,所述多肽分子的序列为:
Ac-IIIIIGPLGLAGGRRRRRRRR-NH2,结构式为:
。
2.根据权利要求1所述的多肽/药物/基因分子负载体,其特征在于,所述多肽分子在浓度大于4.0 mM时,自组装为纳米纤维状结构,纳米纤维直径为5-8 nm,长度为500 nm-10μm。
3.根据权利要求1所述的多肽/药物/基因分子负载体,其特征在于,所述多肽/药物分子负载体溶液的配制步骤包括:
将疏水性药物分子或模拟药物分子溶于熟化的多肽分子溶液,超声20-30分钟,放置6-24小时,使药物分子充分与多肽分子自组装后的纳米纤维作用结合,然后离心,除去溶液底部未结合的药物分子沉淀,上层溶液即为多肽/药物分子负载体溶液。
4.根据权利要求3所述的多肽/药物/基因分子负载体,其特征在于,所述疏水性药物分子为阿霉素,所述模拟药物分子为尼罗红。
5.根据权利要求1所述的多肽/药物/基因分子负载体,其特征在于,所述多肽/药物/基因分子负载体溶液的配制步骤包括:
配制浓度为50 μg/mL的λ-DNA溶液,溶于pH为7.2-7.4的缓冲溶液中,得到基因分子溶液;
将所述多肽/药物分子负载体溶液与基因分子溶液按照预定条件充分混合,得到多肽/药物/基因分子负载体溶液。
6.根据权利要求1-5任一项所述的多肽/药物/基因分子负载体,其特征在于,实现药物向细胞内的有效输运和基因的有效转染步骤包括:将多肽/药物/基因分子负载体溶液与细胞共培养,培养4-12小时后将培养液换为含10%血清的DMEM培养基,继续培养24-48小时。
7.根据权利要求6所述的多肽/药物/基因分子负载体,其特征在于,所述细胞为HEK293细胞。
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