[发明专利]一种吡咯-罗丹明酰腙衍生物及其制备方法和应用以及一种荧光探针

说明书

本发明提供了一种吡咯‑罗丹明酰腙衍生物及其制备方法和应用以及一种荧光探针，属于有机合成领域。本发明以N‑(2‑吗啉‑4‑乙基)‑5‑甲酰基‑2,4‑二甲基‑1H‑吡咯‑3‑甲酰胺和罗丹明6G酰肼为反应物，通过缩合反应即可得到本发明的吡咯‑罗丹明酰腙衍生物；本发明的吡咯‑罗丹明酰腙衍生物能选择性地与二价铜离子作用，由蓝色荧光变为绿色荧光，具有比率荧光效应，可实现裸眼辨别检测，并且能够实现细胞溶酶体内二价铜离子的靶向检测。

技术领域

本发明涉及有机合成的技术领域，特别涉及一种吡咯-罗丹明酰腙衍生物及其制备方法和应用以及一种荧光探针。

背景技术

荧光传感器是监测阳离子、阴离子和小分子的强大工具，主要由于其具有高灵敏度，简便的操作以及实时和在线检测的优点。铜是所有生物体维持正常生存所必需的微量营养素，也是人体中第三丰富的过渡金属。过量的二价铜离子主要是通过溶酶体-胆汁途径排泄到胆汁中，引起人体神经退行性疾病，如威尔森氏病，门克斯病和阿尔茨海默氏病。此外，一些铜转运蛋白定位于溶酶体中以促进细胞对铜的吸收。鉴于二价铜离子在人体内的作用，开发可用于检测亚细胞中特别是溶酶体中的二价铜离子荧光探针非常重要。

现有的二价铜离子荧光探针多为单纯依赖荧光强度的“off-on”或“on-off”荧光探针，容易受到诸如设备效率、环境条件及探针浓度等因素的影响，限制了其进一步应用。相比之下，比率荧光探针的信号参量为两个不同波长处的荧光发射强度的比值，能够消除上述因素影响。但是，能够靶向溶酶体的二价铜离子比率荧光探针寥寥无几。

发明内容

有鉴于此，本发明目的在于提供一种吡咯-罗丹明酰腙衍生物及其制备方法和应用以及一种荧光探针。本发明提供的吡咯-罗丹明酰腙衍生物具有良好的二价铜离子识别性能，在作为荧光探针检测二价铜离子时具有较高的灵敏度和较强的选择性，且能够实现癌细胞溶酶体内二价铜离子的比率荧光检测。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

一种吡咯-罗丹明酰腙衍生物，所述吡咯-罗丹明酰腙衍生物具有式I所示结构：

本发明提供了上述方案所述吡咯-罗丹明酰腙衍生物的制备方法，包括以下步骤：

将N-(2-吗啉-4-乙基)-5-甲酰基-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺、罗丹明6G酰肼和醇类溶剂混合进行缩合反应，得到具有式I所示结构的吡咯-罗丹明酰腙衍生物。

优选的，所述醇类溶剂为乙醇。

优选的，所述乙醇包括无水乙醇或体积浓度为95％的乙醇溶液。

优选的，所述N-(2-吗啉-4-乙基)-5-甲酰基-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺和罗丹明6G酰肼的摩尔比为1:1～1.1。

优选的，所述N-(2-吗啉-4-乙基)-5-甲酰基-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺的物质的量和醇类溶剂的体积比为0.01mol：0.3～0.35L。

优选的，所述缩合反应在回流搅拌条件下进行；所述缩合反应的压力为常压，时间为3～3.5h。

优选的，所述缩合反应完成后还包括：对缩合反应液进行后处理，所述后处理包括以下步骤：

将缩合反应液冷却至室温，使固体析出，过滤后对滤渣进行洗涤，得到具有式I所示结构的吡咯-罗丹明酰腙衍生物。

本发明提供了上述方案所述的吡咯-罗丹明酰腙衍生物或上述方案所述所述制备方法制备的吡咯-罗丹明酰腙衍生物作为荧光探针在测定二价铜离子的光学性质中的应用。

本发明提供了一种用于检测细胞溶酶体内二价铜离子的荧光探针，所述荧光探针包括上述方案所述的吡咯-罗丹明酰腙衍生物或上述方案所述制备方法制备的吡咯-罗丹明酰腙衍生物。