[发明专利]一种红豆树组培苗瓶外生根方法

权利要求书

1.一种红豆树组培苗瓶外生根方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

（1）消毒灭菌：将红豆树幼苗茎段依次在质量浓度为0.1%KMnO₄中灭菌10min、质量浓度为75%的乙醇灭菌0.5min、质量浓度为0.1%HgCl₂灭菌8min，两个消毒灭菌期间用无菌水冲洗4~5次；

（2）初代培养：将步骤（1）消毒后的茎段在无菌超净工作台中剪切成1~1.5cm长，接种于下列培养基中：1/2MS+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L进行诱导培养生产丛生芽；

（3）增殖培养：将步骤（2）所得的丛生芽在无菌超净工作台中剪切成1~1.5cm长，接种于下列培养基中：WPM+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L进行增殖培养得到增殖苗；

（4）瓶外生根培养：将步骤（3）所得的增殖苗切分成单株后，置于NAA100~200mg/L生根液中速醮无根苗基部4~5s后放置10min，插入已消毒好的基质中，生长30~45d，得到生根苗。

2.根据权利要求1所述的一种红豆树组培苗瓶外生根方法，其特征在于：步骤（1）所述的幼苗茎段获取方法为：红豆树种子经90℃热水浸泡24h后，置于消毒灭菌的纯蛭石基质中萌发20d，高于12cm的籽苗茎段。

3.根据权利要求1所述的红豆树组培苗瓶外生根方法，其特征在于，步骤（2）和步骤（3）培养过程中各自使用的培养基每间隔30d更换一次相同培养基。

4.根据权利要求1所述的红豆树组培苗瓶外生根方法，其特征在于，步骤（2）和步骤（3）中培养条件均为：温度23~27℃、光照强度3000lx、光照时间为12h/d，pH调至6.0，培养地点为无菌培养室。

5.根据权利要求1所述的红豆树组培苗瓶外生根方法，其特征在于，步骤（4）中瓶外生根培养条件为：温室大棚温度22-26℃、湿度60%~70%。

6.根据权利要求1所述的红豆树组培苗瓶外生根方法，其特征在于，步骤（4）中被切割的单株，高在4~5cm，基部均斜剪成45°。

7.根据权利要求1所述的红豆树组培苗瓶外生根方法，其特征在于，步骤（4）中基质是经高压灭菌消毒，基质由泥炭土、珍珠岩、蛭石按3：1：3的体积比混合制成，将基质浇水至湿润并拌匀后使用，基质湿度为65%，扦插在10cm的盛有基质的塑料容器中，用保鲜膜罩住植株。