[发明专利]瓦氏马尾藻的规模化培养以及提取多糖的工艺有效
申请号: | 201811309620.8 | 申请日: | 2018-11-06 |
公开(公告)号: | CN109321467B | 公开(公告)日: | 2021-03-26 |
发明(设计)人: | 张菊萍;董国强;胡叶飞;金荣培;张宏杰 | 申请(专利权)人: | 杭州园泰生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12P19/04;C12R1/89 |
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地址: | 311400 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 马尾藻 规模化 培养 以及 提取 多糖 工艺 | ||
1.瓦氏马尾藻的规模化培养以及提取多糖的工艺,其特征在于,所述工艺包括如下步骤:
步骤1)组织繁育:选择健康的瓦氏马尾藻幼苗,采集叶片,置于碘化钾水溶液中浸泡10-30min,取出,然后置于组织捣碎机中进行处理,得到含有10-50个细胞的微小组织块,将微小组织块置于培养液中,培养10d;更换新的培养液,再往培养液中添加GA3和光合细菌,控制培养液中GA3浓度为30-50mg/L,光合细菌的浓度为(1-5)×108cfu/L,继续培养,待主叶叶片长度达到5mm以上时,即完成繁育过程;所述碘化钾水溶液浓度为10g/L;所述培养液按照如下工艺制备而得:往灭菌海水中添加硝酸钠1-2g/L,氯化钠0.5-1g/L,碳酸钠0.5-0.8g/L,氯化铵0.2-0.3g/L,6-BA 10-20mg/L以及亚精胺1-5mg/L,即得;
所述光合细菌为类红球菌、珊瑚红球菌、红平红球菌或任意二者以上的混合物;
步骤2)规模化培养:将藻苗接入到培养池中,培养池中注入灭菌海水,培养50-60d,排出液体,收集瓦氏马尾藻;
步骤3)提取粗多糖:将瓦氏马尾藻干燥,粉碎,然后添加5-10倍重量的水作为提取液,超声波破壁,再加热至80℃,保温条件下水提藻多糖,水提时间为3-4h,提取后离心,去除沉淀物,收集上清液;加入占上清液1-1.5%重量份的三氯乙酸用来沉淀蛋白,离心收集上清液,减压蒸发至原体积的三分之一,然后添加2-3倍体积的无水乙醇,离心,收集沉淀部分,最后进行干燥,得到粗藻多糖。
2.根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述步骤1)中,培养10d的条件为:温度22-23℃,光照强度3000-4000lux,光暗比为12:12。
3.根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述继续培养条件为:温度19-20℃,光照强度2000-3000lux,光暗比为10:14。
4.根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述超声波破壁的条件为:超声波脉冲为9.9s,间隔为3.3s,超声波功率为500W,时间为30-45min。
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