[发明专利]一种双细胞耦合催化生产戊二酸的方法在审
| 申请号： | 201811310272.6 | 申请日： | 2018-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN109295116A | 公开（公告）日： | 2019-02-01 |
| 发明（设计）人： | 陈可泉;苏芮;王昕;许晟;冯娇;欧阳平凯 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12P7/44 | 分类号： | C12P7/44;C12N15/70 |
| 代理公司： | 南京先科专利代理事务所(普通合伙) 32285 | 代理人： | 叶帅东 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 戊二酸 耦合催化 细胞 重组菌株 生产 氨基戊酸 共表达 赖氨酸 终产物 构建 收率 催化 积累 | ||
1.一种双细胞耦合催化生产戊二酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，构建重组菌株E.coli BL- 22AB和E.coli BL-YDT；步骤2，选取重组菌株E.coli BL- 22AB和E.coli BL-YDT混合后，催化L-赖氨酸反应生产戊二酸。
2.根据权利要求1所述的一种双细胞耦合催化生产戊二酸的方法，其特征在于，步骤1中重组菌株E.coli BL- 22AB和E.coli BL-YDT的构建方法，包括以下步骤：第一步，提取重组质粒pET22b–DavBA和pACYC-GabTD，并以酶切位点NdeI进行酶切验证；第二步，将第一步中验证无误的重组质粒pET22b–DavBA导入E.coli BL21 （DE3 ），得到重组菌株E.coli BL-22AB；第三步，将第一步中验证无误的重组质粒pACYC-GabTD导入 E.coli BL21 （DE3 ）中，得到重组菌株E.coli BL-YDT。
3.根据权利要求1所述的一种双细胞耦合催化生产戊二酸的方法，其特征在于，步骤2中重组菌株E.coli BL- 22AB和E.coli BL-YDT的OD比例为1：3。
4.根据权利要求1所述的一种双细胞耦合催化生产戊二酸的方法，其特征在于，步骤2中催化L-赖氨酸反应的温度为37℃，转速为200rpm。
5.根据权利要求1所述的一种双细胞耦合催化生产戊二酸的方法，其特征在于，步骤2中催化L-赖氨酸反应的pH为7.4。
6.根据权利要求1所述的一种双细胞耦合催化生产戊二酸的方法，其特征在于，步骤2中催化L-赖氨酸反应中还包括Cu2+。
7.根据权利要求1所述的一种双细胞耦合催化生产戊二酸的方法，其特征在于，步骤2中催化L-赖氨酸反应的底物浓度为20g/L。
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