[发明专利]一种基于热胀冷缩特性量化微塑料的荧光染色方法

权利要求书

1.一种微塑料的荧光染色标记方法，其特征在于：采用基于热胀冷缩特性的物理方法对微塑料实施荧光染色标记，微塑料粉末的着色步骤为，选自聚乙烯（PE）、聚苯乙烯（PS）、聚氯乙烯（PVC）、聚对苯二甲酸乙二酯（PET）的微塑料粉末加入体积比为1：9至9：1中任意比例，任意比例混溶的水和DMSO混合溶液；在室温~75℃的温度下加热，当温度达到50℃或75℃后，加入染料溶液染色，染色10~30分钟后再迅速在冰水混合溶液中冷却5分钟后取出。

2.根据权利要求1所述的微塑料的荧光染色标记方法，其特征在于：包括以下步骤：

将微塑料在体积比1：9至9：1中任意比例混溶的水和DMSO混合溶液中加热的状态下受热膨胀；

在混合溶液中加入染料溶液以便于其进入微塑料内部，加热规定时间后，迅速在冰水混合溶液中冷却5min后取出，使得染料锁住在塑料内部，从而使微塑料被荧光染料标记。

3.根据权利要求1所述的微塑料的荧光染色标记方法，其特征在于：所述微塑料包括聚乙烯（PE）、聚苯乙烯（PS）、聚氯乙烯（PVC）、聚对苯二甲酸乙二酯（PET）四种塑料粉末中至少一种以上。

4.根据权利要求1所述的微塑料的荧光染色标记方法，其特征在于：所述混合溶液的加热温度选自25℃~75℃中任意温度范围。

5.根据权利要求1所述的微塑料的荧光染色标记方法，其特征在于：染色时间选自10分钟~30分钟中任意时间。

6.根据权利要求1所述的微塑料的荧光染色标记方法，其特征在于：所述染料溶液为选自尼罗红（NR）染料、异硫氰酸荧光素（FITC）或番红染料。

7.一种量化微塑料的荧光染色标记方法，其特征在于：包括以下步骤：制备染液溶液的步骤、微塑料粉末的着色步骤、抽滤步骤、计算微塑料粉末的回收率的步骤，微塑料粉末的着色步骤为，选自聚乙烯（PE）、聚苯乙烯（PS）、聚氯乙烯（PVC）、聚对苯二甲酸乙二酯（PET）的微塑料粉末加入体积比为1：9至9：1中任意比例，任意比例混溶的水和DMSO混合溶液；在室温~75℃的温度下加热，当温度达到50℃或75℃后，加入染料溶液染色，染色10~30分钟后再迅速在冰水混合溶液中冷却5分钟后取出。

8.根据权利要求7所述的量化微塑料的荧光染色标记方法，其特征在于：

所述染液溶液选自尼罗红（NR）染料溶于二甲基亚砜（DMSO）中配制浓度为500μg/mL的尼罗红染液，或者，异硫氰酸荧光素（FITC）和番红染料溶于纯水中配制浓度为500μg/mL的染液。

9.根据权利要求7所述的量化微塑料的荧光染色标记方法，其特征在于：

所述抽滤步骤为，冷却后的样液用聚四氟乙烯滤膜抽滤，先用少量的DMSO溶液洗涤以除去多余的染料溶液，再用纯水洗涤至溶液无色。

10.根据权利要求7所述的量化微塑料的荧光染色标记方法，其特征在于：

所述计算微塑料粉末的回收率的步骤包括，细胞计数板上放在荧光倒置显微镜下观察，用CCD拍照记录明场和荧光状态的微塑料情况，以便于计数并计算微塑料粉末的回收率。