[发明专利]细胞浓缩液的制造方法

说明书

本发明提供一种以简便的方法在短时间内不损耗细胞且不给予细胞过多的负荷的情况下制造细胞浓缩液(其中，不包括人血液)的方法。本发明提供一种细胞浓缩液的制造方法，该方法使用内压过滤方式的细胞悬浮液处理器，所述细胞悬浮液处理器具备：细胞悬浮液入口、滤液出口、细胞悬浮液出口、及配置于该细胞悬浮液入口和细胞悬浮液出口之间的中空纤维型分离膜，其中，该中空纤维型分离膜的总截面积为0.5cm²～1.5cm²，该中空纤维型分离膜的内侧膜面积为0.2m²以下，流过该中空纤维型分离膜内侧的线速度为500cm/分钟～1200cm/分钟，从滤液出口排出的初期过滤流量除以流入细胞悬浮液入口的流量所得的值为0.4～0.7。

本申请是申请日为2013年8月19日、申请号为201380044565.3的中国发明申请“细胞浓缩液的制造方法”的分案申请。

技术领域

本发明涉及一种制造细胞浓缩液的技术，该技术使用填充了中空纤维型分离膜的细胞悬浮液处理器。

背景技术

在细胞医疗的领域中，使用将从活体采集的细胞直接、或在活体外培养后，接种于患者的方法。将这些用于治疗的细胞悬浮于适合治疗的溶液中，或调整为适当的浓度而移植。但是，在从活体中采集细胞的情况下，有时对于治疗而言细胞浓度不足，另外，在将从活体中采集的细胞在体外进一步培养的情况下，大多含有来源于组织的杂质及培养基等。因此，为了将从活体中采集或培养的细胞用于治疗，需要去除杂质及培养基，使其成为在适合治疗的溶液等中悬浮的状态(清洗)，浓缩成适合治疗的细胞浓度。

为了实现上述目的，已知使用离心分离的浓缩、清洗操作。例如，公开有一种为了从人组织中分离再生细胞并浓缩而使用离心分离的方法(专利文献1)。但是，如上使用离心分离的方法有由于装置大型化、对细胞施加负荷、以及成本增大而使可利用的设施受限的担忧。还可以举出，在为了清洗细胞而去除通过离心分离使细胞沉淀后的细胞悬浮液的上清时，细胞有可能暴露在大气中，造成污染等问题。

与之相对，提出一种使用小型且简便的装置，即中空纤维型分离膜，的细胞悬浮液的分离、过滤方法(专利文献2)。在使用中空纤维型分离膜浓缩细胞医疗用途的细胞悬浮液时，为了减轻对细胞的损伤，需要在短时间内进行浓缩处理，而且，由于杂质、培养基成分的分子量较大，因此认为增大中空纤维型分离膜的孔径较好。但是，若增大中空纤维型分离膜的孔径，则会发生细胞导致的堵塞等，或者由于细胞在中空纤维型分离膜上的附着性增加而导致在制备浓缩液的过程中细胞数降低的担忧。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特表2007-524396号公报

专利文献2：日本专利第2928913号公报

发明内容

发明所要解决的课题

本发明的课题为解决在使用中空纤维型分离膜进行细胞浓缩液的制造中的上述问题点。具体而言，提供一种细胞浓缩液的制造方法，该方法在浓缩细胞悬浮液时，即使中空纤维型分离膜的孔径较大，也能在保持优异的细胞回收率的同时在短时间内浓缩细胞。而且，提供一种可以高效地去除悬浮液中存在的蛋白质等杂质的细胞浓缩液的制造方法。

用于解决课题的方案

本发明人为了解决上述课题进行了潜心研究，结果发现，即使中空纤维型分离膜的孔径较大，也能够在将过滤流量及线速度保持在某一特定的范围时，保持优异的细胞回收率，同时在短时间内制造细胞浓缩液，完成了本发明。