[发明专利]一种异恶唑衍生物及其合成方法和检测硫化氢的应用

权利要求书

1.一种异恶唑衍生物BDP-ZN1，其特征在于，结构式为：

2.如权利要求1所述的一种异恶唑衍生物BDP-ZN1的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)按摩尔比1:2～2.5将茴香醛与2,4-二甲基吡咯在脱氧二氯甲烷中搅拌溶解；加入催化量的三氟乙酸，室温下在氩气保护中搅拌该混合溶液10～12小时；随后加入与茴香醛等摩尔的二氯二氰基苯醌，搅拌10～12小时，然后按混合溶液体积的1/10加入三乙胺；继续搅拌10～30分钟后再加入等体积的BF₃·Et₂O，在室温下继续搅拌10～12小时，浓缩后经硅胶柱层析纯化，得到暗红色粉末即化合物1，其结构式为：

2)将DMF和POCl₃按体积比1:1混合，冰浴下搅拌15～30分钟，将化合物1和上述混合物一同溶解在1,2-二氯乙烷中，在55～70℃回流2～6小时；然后加入饱和碳酸氢钠水溶液，二氯甲烷萃取，收集有机相，浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物2，其结构式为：

3)按摩尔比1:1～1.5将化合物2与3,5-二甲基-4-硝基异恶唑在苯中溶解，加入催化量的冰乙酸和哌啶，在氩气保护下加热至回流，搅拌3～6小时，然后待混合液冷却至室温后浓缩，经硅胶柱层析得到纯的化合物BDP-ZN1。

3.如权利要求1所述的异恶唑衍生物BDP-ZN1在制备硫化氢检测试剂中的应用。

4.一种用权利要求1所述的异恶唑衍生物BDP-ZN1检测硫化氢的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)、配制pH＝7.4、浓度为10mM的PBS缓冲溶液，配制20mM的硫化氢水溶液，配置2mM的BDP-ZN1的DMSO溶液；

(2)、取1800μL PBS缓冲溶液、200μL DMSO、1μL BDP-ZN1的DMSO溶液于荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着硫化氢的加入，522nm处的荧光强度的逐渐增强；

(3)、在8个比色皿中，各加入1800μL PBS缓冲溶液、200μL DMSO、1μM BDP-ZN1的DMSO溶液，分别加入硫化氢溶液的量为35、70、105、140、175、210、245、280μM，1min后在荧光光谱仪上测定522nm处荧光强度为205.9、275.5、353.8、455.2、539.2、600.7、635.9、719.2，以硫化氢浓度为横坐标，以荧光强度为纵坐标绘制图，得到硫化氢浓度的工作曲线；线性回归方程为：F-F₀＝2.14619c-137.4，c的单位为10^-6mol/L；

(4)、测定样品溶液时，将测得的荧光强度代入线性回归方程，即可求得硫化氢的浓度。

5.如权利要求1所述的异恶唑衍生物BDP-ZN1在制备细胞成像试剂中的应用。