[发明专利]一种血液中有机污染物的高通量筛查分析方法

权利要求书

1.一种血液中有机污染物的高通量筛查分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)血液中污染物的提取：准确移取适量血液于离心管中，加入分散SPE和有机溶剂后进行涡旋混匀和超声提取，随后离心取上清液，重复溶剂提取步骤1～2次，将上清液合并；

(2)浓缩与定容：对合并后的提取液进行浓缩、定容；

(3)建库：根据SCI数据库及标准样品谱图建立由表1中的30种有机物的精确质量数、保留时间、同位素分布以及特征MS/MS谱图的二个碎片组成的信息库；

表1

(4)上机检测：通过高效液相色谱-飞行时间质谱联用仪对步骤(2)得到的样品进行有机污染物的筛查分析检测；

(5)物质鉴定：将步骤(4)得到的检测结果与步骤(3)中建库结果进行比对，筛查是否存在库中的有机污染物；

步骤(1)所述的分散SPE为MgSO₄-NaCl混合物，所用的有机提取溶剂为3倍血液体积的乙腈；

步骤(3)中所述的建库为将收集的样品信息导入Peakview软件中建库；

步骤(5)中所述的物质鉴定具体为：首先通过一级质谱初步确定出含有的有机污染物，再通过二级质谱、保留时间识别确认有机污染物的具体名称；

步骤(4)所述高效液相色谱-飞行时间质谱条件为：

高效液相色谱仪：HPLC-Agilent1260；

色谱柱：Waters BEH C18柱，2.1mm×50mm,2.5μm,Waters,美国；

柱温：40℃；

流速：0.4mL/min；

梯度洗脱流动相：

正相：A：5％甲酸水溶液，B：甲醇

负相：A：2mM乙酸铵水溶液乙腈水溶液，体积比为：水:乙腈，95:5，B：甲醇；

流动相梯度：

质谱仪：Triple TOF5600-AB SCIEX；

离子源：ESI；

电离模式：正离子模式+负离子模式；

TOF-MS扫描范围：100-1000m/z；

MS-MS扫描范围：50-800m/z；

离子源气压：55psi；

去簇电压：80V，正离子模式；-80V，负离子模式；

碰撞能量：35V，正离子模式；-35V，负离子模式；

离子源温度：550℃；

所述的方法适用的样品包括血液、血清；

步骤(2)使用高纯氮气缓缓吹扫溶剂对提取液进行浓缩；所述定容为使用乙腈定容；

步骤(2)中定容后，当底部若存在少量白色固体MgSO₄与NaCl时，需经过再次离心，将上清液转移至色谱瓶。

2.根据权利要求1所述的一种血液中有机污染物的高通量筛查分析方法，其特征在于，所述的步骤(4)中的筛查分析鉴定为采用Peakview软件的XIC manager对样品中提取出的有机污染物质的色谱峰、同位素分布、保留时间以及二级质谱图进行采集。

3.根据权利要求2所述的一种血液中有机污染物的高通量筛查分析方法，其特征在于，所述Peakview软件中功能参数设置为响应强度1000，信躁比10，一级质谱质荷比误差5ppm，保留时间误差1min。