[发明专利]基于微流控技术的超顺磁纳米微粒分离装置或分离系统在外泌体分离中的应用在审

专利信息
申请号: 201811325666.9 申请日: 2018-11-08
公开(公告)号: CN109294907A 公开(公告)日: 2019-02-01
发明(设计)人: 陶志华;王艺芸;刘振平;戴伊蓓;刘伟伟 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12M1/42 分类号: C12M1/42;C12M1/00;G01N33/68;G01N33/569
代理公司: 北京高沃律师事务所 11569 代理人: 刘奇
地址: 310000 浙江省杭州市*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 纳米微粒 超顺磁 分离柱 分离装置 微流控 磁性颗粒材料 磁分离装置 分离系统 磁分离 柱体 捕获 超顺磁纳米颗粒 标记抗体 出样管道 蛋白分子 进样管道 抗体包被 外加磁场 结合物 势能场 体表面 动能 富集 填充 应用 体内
【权利要求书】:

1.基于微流控技术的超顺磁纳米微粒分离装置或超顺磁纳米微粒分离系统在外泌体分离中的应用;

所述超顺磁纳米微粒分离装置包括分离柱和磁分离装置,所述分离柱包括分离柱柱体、连接在所述分离柱柱体一端的进样管道和连接在所述分离柱柱体另一端的出样管道;所述分离柱柱体中填充有磁性颗粒材料;

所述超顺磁纳米微粒分离系统包括所述超顺磁纳米微粒分离装置、精密微量注射泵和进样器。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述分离柱柱体的内径为1.0~5.0mm;所述分离柱柱体的外径为1.5~5.5mm;所述分离柱柱体的垂直高度为1~8cm。

3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述出样管道的内径为0.2~0.8mm;所述出样管道的外径为0.4~1.2mm;所述出样管道的长度为8~15cm。

4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述进样管道的内径为0.2~0.8mm;所述进样管道的外径为0.4~1.2mm;所述进样管道的长度为8~15cm。

5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述进样管道、出样管道或分离柱柱体的材料为聚四氟乙烯。

6.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述磁性颗粒材料为球形磁性颗粒材料;所述球形磁性颗粒材料的粒径为10~1000μm。

7.根据权利要求1或6所述的应用,其特征在于,所述磁性颗粒材料包括镍、铬、铁或铁氧化物磁性材料。

8.根据权利要求1~6任意一项所述的应用,其特征在于,所述外泌体分离的方法,包括以下步骤:

(1)将生物素标记的外泌体表面蛋白抗体溶液与亲和素包被的超顺磁纳米颗粒溶液混合,得到外泌体表面蛋白抗体-超顺磁纳米颗粒偶合物;

(2)将所述外泌体表面蛋白抗体-超顺磁纳米颗粒偶合物和外泌体样品混合反应,封闭,得到反应液;

(3)将所述分离柱预先置于磁分离装置上,将进样器吸取所述步骤(2)中的反应液后,与进样管道连接;再将进样器固定在精密微量注射泵上,设定微量注射泵的参数后进样;

(4)所述进样完成后,用进样器吸取磷酸盐缓冲液在通过精密微量注射泵控制下对所述分离柱进行冲洗;

(5)所述洗涤完成后,将所述分离柱从磁分离装置上移开,静置5~10min,在精密微量注射泵控制下洗脱捕获有外泌体的超顺磁纳米微粒。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述微量注射泵的参数如下:通道数量优选为1~20个通道;进样速度为0.5~2ml/h,最大行程为140mm;行程分辨率为0.03125μm;线速度调节分辨率为1~5μm/min;行程控制精度为误差≤±0.5%;额定线性推力为>90N。

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