[发明专利]一种富硒蛹虫草奶粉中虫草素和腺苷的检测方法

说明书

本发明涉及虫草素和腺苷同时检测方法，具体涉及一种富硒蛹虫草奶粉中虫草素和腺苷的检测方法，取样品0.50g(精确至0.01g)于50mL具塞离心管中，以一级水为提取溶剂，置涡旋仪以3000r/min涡旋1min后，超声30min；将超声后的上述溶液以8000r/min离心，取上清液1mL移至备有0.050gSAX净化剂容器中，置涡旋仪以3000r/min涡旋1min，静置10min，检测时，色谱柱(Poroshell120C18柱，2.7μm)柱温：35℃；进样量：10.0μL；流动相：A相水溶液，B相甲醇，有效避免其他成份对检测的影响，使检测结果更加精准、更加稳定。

技术领域

本发明涉及虫草素和腺苷同时检测方法，具体涉及一种富硒蛹虫草奶粉中虫草素和腺苷的检测方法。

背景技术

蛹虫草资源开发利用及深入研究在近几十年取得了很大进展，因其具有很高的营养价值和保健功效，蛹虫草及其产品已被越来越多的消费者所接受，蛹虫草的人工栽培已成规模，资源丰富，药理作用广泛，所以开发前景非常广阔。奶粉含有鲜奶中的优质蛋白质、脂肪、多种维生素及矿物质，是适合饮用的营养佳品，将蛹虫草和奶粉有机结合的蛹虫草奶粉不仅保留了奶粉的营养成分，且增加了蛹虫草的药理作用，使其成为一种新型保健品，具有更高的营养价值，因此虫草奶粉的研究和发展对虫草的开发利用及我国乳制品行业今后的发展具有十分重大的意义和推动作用。

虫草素腺苷的主要检测方法是高效液相色谱法，现有技术中对虫草素和腺苷的测定方法大多是针对人工培养蛹虫草菌丝基质进行检测，但这些检测方法不能满足富硒奶粉中虫草素和腺苷的测定，目前在国内文献中鲜少提到富硒奶粉中虫草素和腺苷的检测方法，且方法不完善，并没有明确的检出限及回收率实验，不具有明显的可靠性，因此尚需要进一步研究。

发明内容

针对以上问题，本发明的目的是提供一种高效、便捷、安全的富硒蛹虫草奶粉中虫草素和腺苷的检测方法。

本发明的目的通过以下的技术方案实现： 一种富硒蛹虫草奶粉中虫草素和腺苷的检测方法，包括以下检测步骤：

步骤1试样溶液的制备及提取：

（1）取蛹虫草奶粉样品0.50g（精确至0.01g）于50mL具塞离心管中，以一级水为提取溶剂，置涡旋仪以3000 r/min涡旋1 min后，超声30 min；

（2）将超声后的上述溶液以8000 r/min离心10min，取上清液1mL移至备有0.050 g（±0.001 g）SAX净化剂（以硅胶为基质的强阴离子交换吸附剂）容器中，置涡旋仪以3000 r/min涡旋1 min，静置10 min，取上清液过微孔滤膜，待上机分析；

步骤2虫草素及腺苷标准品溶液的配置；

步骤3色谱条件及数据检测。

将步骤1中所述试样上清液及步骤2中虫草素及腺苷混合标准溶液，按如下液相色谱条件进行测试：

色谱柱 （Poroshell120 C18柱，2.7μm）柱温：35 ℃；进样量：10.0 µL；流动相：A相为水溶液，B相为甲醇，梯度洗脱程序如下：0～1.0 min(B相10%)，1.0～5.5 min(B相10%～50%)，5.6～10.0 min(B相10%)；流速：0.25 mL/min；紫外检测器检测波长：260nm。

进一步，步骤2中，虫草素及腺苷标准品溶液的配置包括以下具体步骤：

(1)准确称取虫草素、腺苷标准品各10 mg，用流动相分别定容到10 mL，摇匀，分别配置成质量浓度均为1000 µg/mL的虫草素母液和腺苷母液；

(2)准确移取浓度为1000 µg/mL的虫草素母液1 mL和1000 µg/mL的腺苷标母液1mL，置于同一容量瓶用一级水定容到10 mL，摇匀，配置成质量浓度为100 µg/mL的虫草素和腺苷混合液；