[发明专利]大蒜茎尖培育的良种繁育方法

权利要求书

1.大蒜茎尖培育的良种繁育方法，其特征在于，具体步骤如下：

步骤一、选取材料：选取当年收获的10月至第二年6月的饱满无病伤大蒜鳞芽，将大蒜鳞芽去除外叶，置于干净的器皿内，用沙布封口；

步骤二、接种环境灭菌消毒：对超净工作台、手和摄子杀菌消毒；

步骤三、大蒜鳞芽脱毒：在超净工作台无菌环境，先用70％酒精浸没大蒜鳞芽，振荡30～60sec，然后用无菌水冲洗1～2次，再用10％次氯酸钠溶液振荡灭菌10min，最后用无菌水洗涤5～7次；

步骤四、剥取大蒜茎尖进行接种：在无菌培养皿内，将大蒜鳞芽置于8～40倍解剖镜下，用消毒后解剖针将大蒜鳞芽的叶片和叶原基剥掉，将剥离好的茎尖接种在接种培养基内培养18～22天，生成组培苗；

步骤五、植株分化和再生：将无毒的组培苗转移在茎尖分化培养基内，20天分化为分化苗，再将分化苗继续扩繁3代或者转移至生根培养基内，30～40天分化成再生植株；

步骤六、获得原原种：对再生植株进行微型蒜诱导或者田间移栽，获得原原种；

步骤七、移栽原原种，繁育良种大蒜。

2.根据权利要求1所述的大蒜茎尖培育的良种繁育方法，其特征在于，所述步骤四的接种培养基为B5+6-BA0.1mg/l+NAA 0.1mg/l+3％蔗糖培养基。

3.根据权利要求1所述的大蒜茎尖培育的良种繁育方法，其特征在于，所述步骤五的茎尖分化培养基为B5+6-BA 1.0mg/l+NAA 0.1mg/l+PP333 3.0ppm+3％蔗糖培养基。

4.根据权利要求1所述的大蒜茎尖培育的良种繁育方法，其特征在于，所述步骤五的生根培养基为MS+6-BA 1.0mg/l+NAA 0.1mg/l+PP333 2.0ppm+3％蔗糖培养基。

5.根据权利要求1所述的大蒜茎尖培育的良种繁育方法，其特征在于，所述步骤六对再生植株进行微型蒜诱导获得原原种的具体步骤为：切取2.8～3.2cm带根再生苗接入微型蒜诱导培养基中，初代培育29～31天，长出白色小鳞茎，68～72天后收获小鳞茎，获得原原种。

6.根据权利要求1～5任一项所述的大蒜茎尖培育的良种繁育方法，其特征在于，所述步骤四～步骤六的组培苗培育、植株分化和再生以及对再生植株进行微型蒜诱导均是在光照强度为3000lux～5000lux、温度为18～28℃的无菌培养室进行。

7.根据权利要求1所述的大蒜茎尖培育的良种繁育方法，其特征在于，所述步骤六再生植株田间移栽获得原原种的具体步骤如下：

步骤6.1、炼苗：从培养室中取出再生植株，即蒜苗，置于10～28℃温室中，对温室封口炼苗2～3天后，打开温室口加入盖过培养基3～5mm的自来水，再继续炼苗2～3天后育苗移栽；

步骤6.2、育苗移栽：育苗基质为蛭石，移栽前对蛭石灭菌并用水浇透，在蛭石上挖小穴，用水冲洗蒜苗后放于蛭石穴中并覆盖；前七天每天浇营养液两次，并适当补水；

步骤6.3、田间移栽：育苗移栽14天后，将蒜苗移栽于环境温度为15～28℃的较大花钵或者大田后正常田间管理，在田间移栽后获得的鳞茎为原原种。