[发明专利]用于检测人参维管束干细胞的特异性基因PgWOX4及其检测方法与应用

说明书

本发明公开了用于检测人参维管束干细胞的特异性基因PgWOX4及其检测方法与应用。本发明公开的用于检测人参维管束干细胞的特异性基因PgWOX4可用于标记人参维管束干细胞。本发明还公开了一种检测人参维管束干细胞部位或位置的方法。本发明填补了非模式植物干细胞检测领域的空白，为非模式植物干细胞定位提供了一套可行的检测方案，具有非常好的研究潜能和应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及用于检测人参维管束干细胞的特异性基因PgWOX4及其检测方法与应用。

背景技术

人参(Panax ginseng C.A.Mey.)为五加科多年生宿根草本植物，在我国已有5000多年的用药历史，具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生精养血、安神益智的功效，被列为《神农本草经》的“上品”，享有“百草之王”的美誉。自然条件下，野山参具有极强的修复能力，可以抵御病原菌及食草动物的侵蚀。人参的“艼变”现象表明人参干细胞具有极强的恢复能力及再生潜力。其中，人参维管束干细胞对人参叶子发育、茎的生长、根的加粗及损伤修复意义重大，然而如何检测人参维管束干细胞尚未见报道。

RNA原位杂交技术是一种将特定标记的已知RNA作为探针，与细胞或组织切片中相应的基因片段相结合(杂交)，形成的杂交体(hybrids)经显色反应，从而对特定基因进行精确定量定位的过程。整体原位杂交是植物材料在整体保持相对完好的情况下进行原位杂交，可以观察到基因表达部位的整体情况。通过原位杂交或者整体原位杂交方法来观察植物干细胞标记基因的表达情况是一种常用的检测植物干细胞的方法。但至今尚未见到采用干细胞标记基因的原位杂交方法检测人参干细胞的报道。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种蛋白质。

本发明提供的蛋白质是如下a)或b)或c)或d)的蛋白质：

a)氨基酸序列是序列2或序列4所示的蛋白质；

b)在序列2或序列4所示的蛋白质的N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质；

c)将序列2或序列4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；

d)与序列2或序列4所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的蛋白质。

为了使a)中的蛋白质便于纯化，可在序列表中序列2或序列4所示的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。

表1、标签的序列

上述c)中的蛋白质，所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。

上述c)中的蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

上述c)中的蛋白质的编码基因可通过将序列1或序列3所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。

上述d)中，“同源性”包括与本发明的序列2或序列4所示的氨基酸序列具有75％或更高，或80％或更高，或85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同源性的氨基酸序列。

本发明的另一个目的是提供与上述蛋白质相关的生物材料。

本发明提供的与上述蛋白质相关的生物材料为下述A1)至A12)中的任一种：

A1)编码上述蛋白质的核酸分子；

A2)含有A1)所述核酸分子的表达盒；