[发明专利]一种便捷的通用型微生物生长曲线检测方法

说明书

本发明公开了一种便捷的通用型微生物生长曲线检测方法。直接可以得到微生物生长的四个周期。解决了传统方法需要大量人工，操作复杂等问题。采用SAW压力传感器实时测量培养瓶内压强的变化。间接得到微生物生长的四个周期。本方法不需要在培养瓶中添加其它物质，减少了误差来源，同时简化了检测步骤，降低了检测成本。本发明优势在于操作简单，实时快速，结果准确度高，能够精确测绘出不同微生物完整的生长曲线，对微生物的研究具有重要意义。

技术领域

本发明应用于检测微生物生长曲线，是一种能够便捷快速实时描绘微生物的生长周期的方法。

背景技术

微生物在自然界中的分布极为广泛，空气、土壤、江河、湖泊、海洋等都有数量不等、种类不一的微生物存在。在人类、动物和植物的体表及其与外界相通的腔道中也有多种微生物存在。

目前世界已知微生物种类约8万余种，绝大多数微生物对人类和动、植物的生存是有益而必需的。自然界中氮、碳、硫等多种元素循环靠微生物的代谢活动来进行。例如空气中的大量氮气只有依靠微生物的作用才能被植物吸收，土壤中的微生物能将动、植物蛋白质转化为无机含氮化合物，以供植物生长的需要，而植物又为人类和动物所利用。因此，没有微生物，植物就不能新陈代谢，而人类和动物也将无法生存。

微生物在农业(如：以菌造肥、以菌防病、以菌催长)、工业(如：制造皮革、处理废水、降解有机磷和有毒物质)、食品生产和安全(食品酝酿、食品储存)、医疗卫生(致病微生物、真菌抗生素、血培养)等方面扮演着至关重要的角色。因此，便捷的微生物生长检测方法显得尤为重要。

目前，微生物生长的测量主要分为四类：1.干重测量，2.体积测量，3.比浊法和4.生理指标法。用于微生物生长检测的常规技术包括由于其通用性和易操作性而在实验中广泛使用的前三种技术。干重测量：可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20％。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1-5次，进行干燥。这种方法没有办法区别微生物的死活。体积测量：又称测菌丝浓度法。通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。比浊法：微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。这种方法没有办法区别微生物的死活。上述三种方法又称为传统方法，传统方法需要长的操作时间并且涉及大量的手动操作。这些缺点使得当前可用的技术对于自动测量是不实际的。此外，侵入性操作可导致杂菌干扰和内容物介质的损失，导致低精度和低效率。因此，常规方法不能实现对微生物生长的快速和准确的分析。生理指标法；在微生物生长过程中，一系列与生长相关生理指标会伴随着微生物生长而改变，通过测定该类物质能够确定微生物生长状态。生物指标技术要求高，操作复杂。寻求一种快速、准确、简便、通用型的微生物生长检测方法成为了当前微生物检测主流。

发明内容

为了解决传统方法存在的缺点，本发明设计了一种快速实时便捷检测微生物生长曲线方法。

本发明提供的微生物生长曲线检测方法。培养瓶中盛放有微生物和培养基，培养瓶盖由于微生物代谢活动引起培养瓶内部气压改变会发生一定程度的微小形变。培养瓶盖上方的SAW 传感器探测微小形变带来的压力变化，并将压力变化转化为电信号。通过采集卡和计算机对电信号采集和分析得到微生物生长曲线。

进一步的，所述微生物生长曲线检测方法包括如下步骤：

步骤一取25ml样品置于盛有225ml培养基的培养瓶中，制成1∶10的样品匀液；