[发明专利]一种蛋白纯化系统及方法

权利要求书

1.一种蛋白纯化系统，其特征在于，由依次连接的第一除菌过滤器、换热器、第二除菌过滤器和蛋白A亲和层析柱组成；

所述第一除菌过滤器中滤膜的孔径为0.20～0.22μm；

所述第二除菌过滤器中滤膜的孔径为0.20～0.22μm；

所述蛋白A亲和层析柱的填料为MabSelect Sure、MabSelect LX、AmsphereA3、PraestoJetted A50或Prism A；

所述纯化系统用于蛋白的连续性纯化。

2.根据权利要求1所述的蛋白纯化系统，其特征在于，所述换热器为水浴加热器。

3.一种蛋白纯化方法，其特征在于，包括下列步骤：

将蛋白溶液通过权利要求1所述蛋白纯化系统处理；

所述换热器对蛋白溶液进行加热；

所述蛋白A亲和层析的流程依次为：消毒、平衡液洗涤、上样、平衡液洗涤、中间清洗缓冲液洗涤、平衡液洗涤和洗脱液洗脱目标抗体；

所述中间清洗缓冲液为：pH值为5～6，电导率为20～100mS/cm的缓冲液；

所述中间清洗缓冲液为醋酸盐缓冲体系、磷酸盐缓冲体系或柠檬酸盐缓冲体系；

所述中间清洗缓冲液使用氯盐调整电导率。

4.根据权利要求3所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述加热的温度为10～30℃。

5.根据权利要求4所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述加热的温度为10～25℃。

6.根据权利要求3所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述氯盐为氯化钠。

7.根据权利要求3所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述中间清洗缓冲液的pH值为5.5～6。

8.根据权利要求7所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述中间清洗缓冲液的pH值为5.5～5.8。

9.根据权利要求3所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述中间清洗缓冲液的电导率为50～100mS/cm。

10.根据权利要求9所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述中间清洗缓冲液的电导率为50～80mS/cm。

11.根据权利要求3～10任一项所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述平衡液为Tris-HCl+150～160mM NaCl、pH7.4～7.6的缓冲液。

12.根据权利要求11所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述平衡液为50～55mMTris-HCl。

13.根据权利要求11所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述目标抗体为CHO细胞表达的单抗时，所述洗脱液为NaAc-HAc、pH3.0～3.5的缓冲液。

14.根据权利要求13所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述洗脱液为50～55mMNaAc-HAc。

15.根据权利要求3所述的蛋白纯化方法，其特征在于，在所述蛋白A亲和层析之后还包括对收集的洗脱液进行阴离子交换层析处理：

依次消毒、平衡液洗涤、上样和平衡液洗涤。

16.根据权利要求15所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述阴离子交换层析时的平衡液为Tris-HCl、pH8.0～8.2的缓冲液。

17.根据权利要求16所述的蛋白纯化方法，其特征在于，所述阴离子交换层析的填料为POROS 50HQ、Q Sepharose FF、Capto Q或Eshmuno Q。