[发明专利]橡胶树谷氧还蛋白HbGRX在橡胶树抗死皮品种选育领域中的应用在审
申请号: | 201811336372.6 | 申请日: | 2018-11-12 |
公开(公告)号: | CN109468292A | 公开(公告)日: | 2019-03-15 |
发明(设计)人: | 袁坤;罗萍;张华林;郭秀丽;冯成天;胡义钰;王真辉 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院橡胶研究所 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/82;A01H5/04;A01H6/38;C12Q1/6895 |
代理公司: | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人: | 蒋常雪 |
地址: | 571101 *** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 橡胶树 死皮 品种选育 蛋白 植物基因工程技术 活性氧清除 生物学信息 细胞活性氧 基因克隆 理论基础 乳管 研发 应用 新品种 下调 积累 培育 表现 分析 研究 | ||
1.一种橡胶树谷氧还蛋白HbGRX在分子选育抗死皮橡胶树品种领域中的应用,其特征在于,所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX具有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,编码所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX的基因,具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
3.含有所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX基因的表达载体在分子选育抗死皮橡胶树品种领域中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述表达载体为橡胶树谷氧还蛋白HbGRX基因插入到质粒pCAMBIA1302中形成的重组质粒pCAMBIA1302-HbGRX-GFP。
5.橡胶树谷氧还蛋白HbGRX用于制备抗死皮品种选育的分子标记物的用途,其特征在于,所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX具有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。
6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,编码所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX的基因,具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
7.一种分子选育抗死皮橡胶树品种的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)选取不同品种的橡胶树,并割取各品种橡胶树的死皮树树皮;
(2)提取各品种死皮树树皮的总RNA,并经反转录得到cDNA第一链;
(3)以提取的cDNA第一链为模板,设计HbGRX-QF和HbGRX-QR为荧光定量引物,以橡胶树18S rRNA为内参基因,采用实时定量RT-PCR法分析HbGRX基因在上述不同品种死皮树树皮中的表达模式;其中,荧光定量引物序列为:
HbGRX-QF:5’-CGTTTCTTCCAATTCTGTTGTCGTT-3’;
HbGRX-QR:5’-CAATGTGCTTGCCACTGATG-3’;
(4)根据测定的实时定量RT-PCR结果进行分析,筛选出高表达HbGRX基因的品种,即为所需的抗死皮橡胶树品种。
8.橡胶树谷氧还蛋白HbGRX在橡胶树死皮防控领域中的应用,其特征在于,所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX具有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,编码所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX的基因,具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
10.一种橡胶树死皮防控方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)配制橡胶树死皮康复营养液喷施于橡胶树死皮树割面,用于使死皮树恢复产胶,并采集死皮树恢复产胶前、后割面树皮;
(2)采集提取树皮的总RNA,经反转录得到cDNA第一链;
(3)以得到的cDNA第一链为模板,以HbGRX-QF和HbGRX-QR为荧光定量引物,以橡胶树18S rRNA为内参基因,采用实时定量RT-PCR方法分析HbGRX基因在死皮树恢复产胶前、后割面树皮中的表达情况;其中,荧光定量引物序列为:
HbGRX-QF:5’-CGTTTCTTCCAATTCTGTTGTCGTT-3’;
HbGRX-QR:5’-CAATGTGCTTGCCACTGATG-3’;
(4)根据实时定量RT-PCR分析结果,监控HbGRX基因在死皮树恢复产胶后表达量的变化情况。
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