[发明专利]橡胶树谷氧还蛋白HbGRX在橡胶树抗死皮品种选育领域中的应用在审

专利信息
申请号: 201811336372.6 申请日: 2018-11-12
公开(公告)号: CN109468292A 公开(公告)日: 2019-03-15
发明(设计)人: 袁坤;罗萍;张华林;郭秀丽;冯成天;胡义钰;王真辉 申请(专利权)人: 中国热带农业科学院橡胶研究所
主分类号: C12N9/04 分类号: C12N9/04;C12N15/53;C12N15/82;A01H5/04;A01H6/38;C12Q1/6895
代理公司: 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 代理人: 蒋常雪
地址: 571101 *** 国省代码: 海南;46
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摘要:
搜索关键词: 橡胶树 死皮 品种选育 蛋白 植物基因工程技术 活性氧清除 生物学信息 细胞活性氧 基因克隆 理论基础 乳管 研发 应用 新品种 下调 积累 培育 表现 分析 研究
【权利要求书】:

1.一种橡胶树谷氧还蛋白HbGRX在分子选育抗死皮橡胶树品种领域中的应用,其特征在于,所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX具有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,编码所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX的基因,具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。

3.含有所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX基因的表达载体在分子选育抗死皮橡胶树品种领域中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述表达载体为橡胶树谷氧还蛋白HbGRX基因插入到质粒pCAMBIA1302中形成的重组质粒pCAMBIA1302-HbGRX-GFP。

5.橡胶树谷氧还蛋白HbGRX用于制备抗死皮品种选育的分子标记物的用途,其特征在于,所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX具有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。

6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,编码所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX的基因,具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。

7.一种分子选育抗死皮橡胶树品种的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)选取不同品种的橡胶树,并割取各品种橡胶树的死皮树树皮;

(2)提取各品种死皮树树皮的总RNA,并经反转录得到cDNA第一链;

(3)以提取的cDNA第一链为模板,设计HbGRX-QF和HbGRX-QR为荧光定量引物,以橡胶树18S rRNA为内参基因,采用实时定量RT-PCR法分析HbGRX基因在上述不同品种死皮树树皮中的表达模式;其中,荧光定量引物序列为:

HbGRX-QF:5’-CGTTTCTTCCAATTCTGTTGTCGTT-3’;

HbGRX-QR:5’-CAATGTGCTTGCCACTGATG-3’;

(4)根据测定的实时定量RT-PCR结果进行分析,筛选出高表达HbGRX基因的品种,即为所需的抗死皮橡胶树品种。

8.橡胶树谷氧还蛋白HbGRX在橡胶树死皮防控领域中的应用,其特征在于,所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX具有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,编码所述橡胶树谷氧还蛋白HbGRX的基因,具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。

10.一种橡胶树死皮防控方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)配制橡胶树死皮康复营养液喷施于橡胶树死皮树割面,用于使死皮树恢复产胶,并采集死皮树恢复产胶前、后割面树皮;

(2)采集提取树皮的总RNA,经反转录得到cDNA第一链;

(3)以得到的cDNA第一链为模板,以HbGRX-QF和HbGRX-QR为荧光定量引物,以橡胶树18S rRNA为内参基因,采用实时定量RT-PCR方法分析HbGRX基因在死皮树恢复产胶前、后割面树皮中的表达情况;其中,荧光定量引物序列为:

HbGRX-QF:5’-CGTTTCTTCCAATTCTGTTGTCGTT-3’;

HbGRX-QR:5’-CAATGTGCTTGCCACTGATG-3’;

(4)根据实时定量RT-PCR分析结果,监控HbGRX基因在死皮树恢复产胶后表达量的变化情况。

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