[发明专利]二维液相色谱接口在线浓缩溶剂交换装置有效
申请号: | 201811336383.4 | 申请日: | 2018-11-12 |
公开(公告)号: | CN109541051B | 公开(公告)日: | 2021-08-17 |
发明(设计)人: | 刘颖超;张权青;李顺祥;杨芃原;黄元宇 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/82 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 张磊 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 二维 色谱 接口 在线 浓缩 溶剂 交换 装置 | ||
本发明提供一种二维液相色谱接口在线浓缩溶剂交换装置。所述二维液相色谱接口在线浓缩装置包括:一维液相色谱,溶剂稀释腔,在线浓缩柱,洗脱溶剂,二维液相色谱,废液收集装置。一维液相色谱用于样品第一维分离,分离开的馏分依次注入各溶剂稀释腔中。溶剂稀释腔预先注入远大于馏分体积的稀释溶剂,从而实现溶剂切换,将稀释后的馏分依次注入浓缩柱,目标物将全部浓缩于浓缩柱上,随后用小体积洗脱溶液将目标物从浓缩柱上洗脱进行后续二维分离或者进入检测器进行检测。本装置实现在线溶剂交换,避免线下冻干复溶等繁琐操作及不必要的样品损失;在线浓缩的特性,避免了一维样品馏分浓度过低不易被检测的问题,提高后续检测水平。
技术领域
本发明涉及色谱领域,特别涉及一种二维液相色谱接口在线浓缩溶剂交换装置。
背景技术
色谱分析是现代分离分析技术中一种重要的技术手段,其基本原理是利用物质在固定相和流动相中的分配系数不同,在流动相的作用下,物质在两相中作相对移动,使其在两相之间进行多次分配,从而实现仅具有微小差异的各种物质。根据流动相的不同,可以将色谱分为液相色谱,气相色谱及超临界色谱等。近年来,液相色谱凭借其高灵敏、高分辨的特点在蛋白及肽段的分离过程中有着广泛应用,并通过与质谱技术联用,为复杂蛋白组学的研究提供高效的分离检测手段。
随着各组学的研究不断深入发展,对于液相色谱分离技术的要求也越来越高。现在常用液相色谱技术中,为方便操作,常在一维色谱柱后接馏分收集器,待馏分收集完成后,进行冻干、浓缩、复溶的操作,随后将复溶的样品进一步分离检测。整个操作过程耗时时间长,且会造成样品损失,不利于后续检测。
因此,鉴于以上问题,本发明通过研究创新,设计并制造了一种液相色谱接口在线浓缩溶剂交换装置,能够实现在线全自动化,取代冻干复溶的过程,尽可能避免样品损失,帮助提高后续样品检测的高效性及准确度,使其具有产业化的利用价值。
发明内容
为解决至少一项上述现有缺陷(不足),本发明的目的在于提供了一种二维液相色谱接口在线浓缩溶剂交换装置,用于色谱分离过程中,取代经一维色谱分离后,还需对馏分进行冻干、复溶的过程,实现在线自动化操作,减少样品损失,帮助提高后续样品检测的高效性及准确度。
本发明提供的二维液相色谱接口在线浓缩溶剂交换装置,包括:一维液相色谱、溶剂稀释腔阵列、在线浓缩柱、洗脱溶剂、二维液相色谱和废液收集装置,一维液相色谱包括样品瓶、一维液相色谱流动相、第一泵和一维色谱柱,一维液相色谱流动相通过第一泵和管道连接一维色谱柱一端,第一泵和一维色谱柱连接处连接样品瓶的出口;溶剂稀释腔阵列为由若干个溶剂稀释腔组成,一维色谱柱另一端通过一条管道和第一开关阀连接第一废液收集装置,一维色谱柱另一端通过另一条管道连接溶剂稀释腔进口;溶剂稀释腔出口通过第三泵和第二开关阀以及管道连接在线浓缩柱一端,第二开关阀和在线浓缩柱连接处通过管道连接第二泵一端,第二泵另一端通过管道连接洗脱剂,在线浓缩柱另一端通过一条管道和第三开关阀连接第二废液收集装置,在线浓缩柱另一端通过另一条管道连接二维液相色谱;所述一维液相色谱用于第一维分离,随后不同馏分分别注入溶剂稀释腔阵列中,每个溶剂稀释腔中预先注入远大于馏分体积的稀释溶剂,原有溶剂被稀释成极性相反的新溶剂,实现在线溶剂切换;稀释后的新溶剂带动馏分在泵的作用下进入浓缩柱,目标物全部浓缩于浓缩柱上,随后用小体积洗脱溶液将目标物从浓缩柱上洗脱进入二维液相色谱,进行二维分离或者直接进入检测器进行检测分析,所有废液经色谱柱后在废液收集装置中被收集。
本发明中,所述一维液相色谱固定相为C18,C12,C8或C4等非极性物质或硅胶、离子交换树脂等正极性物质。
本发明中,所述溶剂稀释腔阵列由一系列溶剂稀释腔组成,溶剂稀释腔数量为1 ~500 个。
本发明中,所述溶剂稀释腔体积与所接馏分体积与稀释倍数相关,且成比例关系。
本发明中,所述每一个溶剂稀释腔中均装有体积远大于馏分体积的稀释溶剂,如水等与流动相极性相反的溶剂。
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